目的：　　为了评价各医院实验室对于凝血因子Ⅷ（简写：FⅧ）项目的检测能力，以及实验室间质量评估的需要，我们研制了多种浓度水平的FⅧ室间调查品。　　方法：　　1.FⅧ调查品的制备：选用不同来源、FⅧ含量各异的新鲜冰冻血浆，或者采用化学吸附法，调整血浆中FⅧ的浓度。用正交试验确定加入冻干保护剂的最佳比例，并依据冻干分析软件监控并优化冻干工艺，制备多种浓度的FⅧ室间调查品。　　2． FⅧ调查品的评价：　　（1）参照《中国生物制品检定规程》中的相关要求，对自制调查品的外观性状、分装精度、含水量、复溶性、同质性和适用性等性能指标进行评价。　　（2）参照中国合格评定国家认可委员会《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL03）对自制调查品的均匀性和稳定性进行评价。　　（3）依据临床实验室标准化协会（CLSI）EP25《evaluation of stability of In Vitro Diagnostic Reagents》中的加速试验方法预估自制调查品的有效期。　　3. FⅧ调查品的应用：采用自制调查品进行3次室间调查，评价自制调查品的实际应用性以及各实验室FⅧ项目的检测能力。由于中国绝大多数的凝血因子检测实验室采用凝固法测定其活性，以％（活性）表示凝血因子所含的量（1%大致相当于0.01个国际单位IU/mL），因此文中凝血因子的含量（即凝血因子的浓度）以%表示。　　结果：　　1.制备：　　（1）经浓度调整可以得到FⅧ范围在5%至110%的备用血浆。　　（2）根据正交试验得到冻干保护剂的最佳配比：海藻糖（1.5% w/v）甘氨酸（0.5%w/v）4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）（0.2% w/v）。　　（3）冻干工艺优化流程为：1小时内将样本温度降至-40℃；预冻5小时后启动主干燥（真空度为0.4mPa）；隔板升温至-20℃；解析干燥（真空度为极限真空）隔板升至0℃；总干燥过程为48小时。　　2.评价：　　（1）自制调查品的无菌实验，外观性状、复溶性、同质性、适用性、分装精度（最佳CV%为0.57）和含水量（1.29%至2.87%）均符合《中国生物制品检定规程》的要求。　　（2）均匀性评价：采用单因素方差分析比较自制调查品瓶内和瓶间的差异，各批调查品的实际统计量F值为0.064至2.13，均小于界值3.02（F（9,10）），说明在α=0.05水平时，自制调查品中的FⅧ含量均匀。稳定性评价：采用两组独立样本的t检验比较自制调查品间隔30天的FⅧ浓度的差异，统计量p值为0.053至0.87，p值均>0.05，说明在α=0.05，t0.05(10)=2.228，间隔30天自制调查品无显著差异，自制调查品中FⅧ的含量稳定。　　（3）有效期预估：抽取两批调查品（FⅧ浓度接近商品化质控品），用加速试验Arrhenius方程式进行有效期推断，自制调查品在4℃的的有效期分别为197天和106天。　　3.应用：采用WHO凝血因子室间质评统计方式，以等级制评价各实验室的检测结果（分ABCDE五个等级，A级最优）。第一、二次室间调查的范围是上海市6家开展凝血因子项目检测的实验室，所发放的自制FⅧ调查品浓度水平分别为7.1%、50.3%和78.5%；103.6%、48.9%和36.0%。并同时发放商品化质控品对实验室的检测能力进行评价，两者评价结果一致，两次调查均有一家实验室超出A级。参加第三次调查的实验室为18家，涵盖中国14个省市。发放5个批号样本，每批调查品FⅧ（%）的中位数分别为42.2、40.5、24.1、100.3和4.5，SD分别为7.0、6.9、3.0、15.7和1.9。经评价除两家实验室检测结果超出之外，其余16家实验室的检测结果均为A级，此次室间质评结果较佳。　　结论：　　本文经过研究提出了一种新的方法，优化冻干保护剂的配比和冷冻干燥工艺，用于制备不同浓度水平的FⅧ调查品，并初步建立FⅧ室间调查品的制备和评价方法，实际应用于三次室间调查。自制FⅧ调查品的性能参数满足室间调查品的需要。