论文部分内容阅读
目的：观察香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract, CSE)是否导致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Rat alveolar Type Ⅱ epithelial cell, RLE-6TN)细胞周期的改变以及在这其中转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)是否有发挥作用。方法：选用健康清洁级SD雄性大鼠8只(重量：180～220g),完全随机平均分配为对照组、烟熏组,每组4只,给予烟熏组大鼠暴露于香烟烟雾中每天6小时连续3天,于第4天处死动物后取肺组织,进行石蜡包埋切片后,HE染色观察结构改变,免疫组化法测定CyclinD1的表达情况。体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,除对照组外,其余各组分别予0.25%、0.5%、1%浓度的CSE刺激48 h。TGF-β1受体抑制剂(SB431542)预处理细胞6 h,实验设计为对照组、1%CSE组、SB431542组、1%CSE+SB431542组,CSE刺激48 h。各组细胞于37℃、5% CO2培养箱中培养48 h后收集细胞,分别采用流式细胞仪检测细胞周期,ELISA、Western blot法测定TGF-β1、CyclinD1蛋白的表达情况。结果：烟熏组大鼠肺组织发生形态学及病理学的改变,TGF-β1表达增加、CyclinD1表达抑制(与对照组比较)。CSE暴露干预细胞后,G1期细胞的比例呈浓度依赖性与时间依赖性的增高,同时TGF-β1表达增加、CyclinD1表达抑制(与空白对照组比较P<0.05)。使用SB431542预处理细胞后,CSE干预细胞发现CyclinD1表达增加(与模型组比较P<0.05)。结论：综上所述,我们发现香烟烟雾可以诱导大鼠肺发生病理学改变,伴有TGF-β1、CyclinD1表达变化。CSE暴露诱导RLE-6TN发生细胞周期改变,G1期细胞比例增高,这一改变可能是通过TGF-β1/CyclinD1通路发挥作用,且TGF-β1发挥着重要作用。