一、目的子痫前期（Pre-eclampsia,PE）,是指妊娠妇女20周以后,出现血压升高和蛋白尿,以及头痛、眼花、恶心、呕吐、上腹不适等症状,其并发症可导致肺水肿、胎盘早剥、胎儿生长受限、死胎及死产等。近年来,子痫前期发病率呈上升趋势。糖基化是蛋白质翻译后修饰的一种重要方式,蛋白质的糖基化参与调节多种生理和病理过程。糖基化异常则会导致人绒毛膜滋养细胞疾病、肿瘤、不孕和免疫功能障碍等问题。翅荚百脉根凝集素（Lotus Tetragonolobus Lectin,LTL）可识别α1,3-岩藻糖基化糖链。含有岩藻糖修饰的路易斯系列抗原（Lewis antigen）是细胞表面糖链的常见结构单元,其在许多生理和病理过程中均发挥着至关重要的作用。Lewis系列抗原的生物合成涉及多个岩藻糖基转移酶。其中,N-岩藻糖基转移酶Ⅶ（FUT7）具有高度底物专一性,只能合成唾液酸化的路易斯寡糖-X抗原（sialy Lewis-X,sLeX）。sLeX是表达在胚胎组织及肿瘤细胞糖蛋白分子上的寡糖抗原,也可识别α1,3-岩藻糖基化糖链。有文献表明,sLeX参与胚胎着床过程,且与黏附侵袭过程一致。目前,sLeX及FUT7的糖基化过程与子痫前期致病机制的关系尚未见报导。二、实验方法1、通过免疫组织化学、凝集素印迹（Lectin blot）和蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测α1,3-岩藻糖（LTL）、sLeX、FUT7在早孕（1～12周）、晚孕（28～40周）妇女及子痫前期患者胎盘组织中的表达与定位;2、通过转染FUT7 cDNA上调和FUT7 siRNA下调质粒,应用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）、Western blot、Lectin blot及免疫荧光实验检测α1,3-岩藻糖、sLeX、FUT7在人绒毛膜滋养层细胞（HTR-8/Svneo）中的表达和定位情况;3、通过Transwell迁移侵袭实验、Outgrowth胎盘外生长实验、明胶酶谱（Gelatin zymogram）实验、Edu（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）掺入实验和Western blot实验检测转染FUT7 cDNA上调和FUT7 siRNA下调质粒后对人绒毛膜滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响;4、通过sLeX蛋白Pull Down实验、应用质谱分析寻找sLeX的靶蛋白;5、通过免疫共沉淀（Immunoprecipitation,IP）和Western blot实验检测妊娠特异性糖蛋白8（Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 8,PSG8）、sLeX、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3信号通路相关蛋白的表达及加入Smad3通路抑制剂（Dibutyryl-c AMP）后对人绒毛膜滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响。三、实验结果1、通过免疫组化、Lectin blot和Western blot实验发现子痫前期患者胎盘中的α1,3-岩藻糖、sLeX、FUT7的表达较晚孕妇女组织显著降低。2、通过转染FUT7 cDNA上调和FUT7 siRNA下调质粒,利用Real-time PCR、Western blot、Lectin blot及免疫荧光实验显示转染FUT7 cDNA上调质粒组中α1,3-岩藻糖、sLeX、FUT7的表达量较对照组明显升高,转染FUT7 siRNA下调质粒组较对照组则明显降低。3、通过转染FUT7 cDNA上调和FUT7 siRNA下调质粒,应用Transwell迁移侵袭实验、Outgrowth胎盘外生长实验、明胶酶谱（Gelatin zymogram）实验、Edu（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）掺入实验和Western blot实验,结果显示,上调FUT7组人绒毛膜滋养层细胞（HTR-8/Svneo）细胞增殖、迁移和侵袭能力也明显增强,下调FUT7组显著降低。4、通过Pull down实验、质谱数据分析结果发现并选含有sLeX的妊娠特异性糖蛋白8（PSG8）,进一步研究发现,PSG8可促进激活TGF-β1/Smad3信号通路。5、通过免疫共沉淀及Western blot检测发现转染FUT7 cDNA质粒后,PSG8升高,促进TGF-β1/Smad3信号通路激活从而增强HTR-8/Svneo细胞的增殖和迁移侵袭能力,转染FUT7 siRNA质粒结果则与之相反。加入Smad3通路抑制剂可以抑制Smad3通路相关蛋白的表达。四、结论1、α1,3-岩藻糖、sLeX和FUT7在子痫前期胎盘组织的表达水平较正常妊娠妇女下降。2、FUT7促进人绒毛膜滋养层细胞（HTR-8/Svneo）的迁移、侵袭及增殖能力。3、FUT7促进PSG8分子上sLeX的合成,激活TGF-β1/Smad3信号通路,增强HTR-8/Svneo细胞的生长、增殖及迁移侵袭能力。