兔双侧椎动脉颈段完全阻断后颈髓血流和功能变化的实验研究

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目的:椎动脉损伤常见于颈部外伤、手术损伤等,椎动脉损伤后,其临床症状易与脑外伤相混淆,普通影像学上又无特殊表现,因此极易被漏诊。目前,椎动脉损伤引起颈髓缺血的程度尚无定论,但在临床工作中,双侧椎动脉损伤后,患者可出现较高的死亡率。颈髓、脊神经根血流量的90%由椎动脉供给[1],故椎动脉损伤越来越引起了人们的重视。本文构建兔双侧椎动脉颈段完全阻断这一动物模型,观测双侧椎动脉阻断前、后颈髓血流量的变化,了解椎动脉损伤对颈髓血供的影响,观察双侧椎动脉阻断前、后诱发电位的变化,以此了解椎动脉损伤与颈髓功能变化的关系。方法:通过手术结扎兔双侧椎动脉颈段来实现双侧椎动脉完全阻断,建立兔双侧椎动脉损伤动物模型,使用LDF(Laser Doppler Flowmetry,激光多普勒血流测定仪)观测双侧椎动脉阻断前、后颈髓的血流改变;用诱发电位的变化来反映双侧椎动脉阻断前、后颈髓功能的改变;应用HE(Hematoxylin and eosin)染色和电镜技术观察双侧椎动脉阻断前、后颈髓组织病理学改变;并借助免疫组化技术检测C-FOS(即早反应基因)、BCL-2(B-cell lymphoma emia-2 gene,B细胞淋巴瘤白血病2基因)、NSE (Neuron specific enolase,神经元特异性烯醇酶)在兔双侧椎动脉完全阻断前、后颈髓组织中的表达情况。结果:1. 兔双侧椎动脉完全阻断4小时后,颈髓血流下降最明显,8小时后,颈髓血流较前有所恢复但仍明显低于正常,24小时后,颈髓血流有所恢复,但还未达到正常水平,7天后,颈髓血流接近正常血流值, 56天后颈髓血流恢复接近正常水平,与NC组 (normal control group)相比,无明显差异(P>0.05);2. 兔双侧椎动脉完全阻断4小时后,诱发电位与NC组兔相比,无明显改变(P>0.05),8小时后,诱发电位潜伏时有所延长、振幅有所缩短,与4小时相比,这种变化较明显(P<0.05),24小时后,诱发电位潜伏时和振幅与8小时相比,无明显变化(P>0.05),7天后,诱发电位潜伏时和振幅基本恢复接近正常水平(P>0.05),56天后,诱发电位潜伏时和振幅与NC组兔相比,二者间无明显差异(P>0.05); <WP=8>3. C-FOS和BCL-2免疫组化表达变化趋势相似:在兔双侧椎动脉阻断后4小时,它们表达最强烈,8小时后,表达虽然较强,但较4小时有所下降,24小时,表达基本接近正常水平,7天及56天后,这二者均呈正常表达。4. 兔双侧椎动脉完全阻断4小时后,颈髓组织NSE免疫组化呈弱阳性表达,8小时后,NSE表达明显增强,24小时后,NSE表达强度跟8小时无显着变化(P>0.05),7天后或56天后,NSE又呈弱阳性表达。HE染色、电镜检查结果示:4小时,颈髓组织无明显病理改变,8小时和24小时后呈现缺血性损伤,7天或56天后,颈髓组织结构正常,无病理学改变。结论:兔双侧椎动脉完全阻断后,颈髓血流在短期内明显下降,通过代偿机制,颈髓血流逐渐恢复,最终接近正常水平;与此同时,颈髓组织出现缺血性损伤,引起诱发电位的潜伏时和振幅一定程度改变;BCL-2、C-FOS表达随着应急反应的改变而改变;NSE表达的变化趋势与颈髓组织HE染色、电镜检查结果改变具有相似性;Willis环在双侧椎动脉阻断后对颈髓血供的代偿可能起着极其重要的作用。
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