目的：脓毒症所致急性呼吸窘迫综合征（acute respirarory distress syndrome，ARDS）为临床常见危重症，肺泡上皮细胞损伤是其主要病理改变之一。研究显示维生素D除具有经典的调节钙磷平衡作用外，还具有免疫调节和抗肿瘤等广泛的骨外生物学效应。目前有关维生素D在组织结构细胞，特别是脓毒症时肺泡Ⅱ型上皮细胞（alveolar epithelial cell typeⅡ，ATⅡ）中干预作用的研究相对少见。本研究选取人ATⅡ细胞系A549为研究对象，以脂多糖为刺激因素，探究维生素D对ATⅡ炎症反应的干预作用及相关机制，为临床防治脓毒症型ARDS提供理论依据。方法：1.以体外培养的A549细胞为研究对象，首先，按照对照组、LPS刺激组（1μg/ml）、 LPS＋25（OH）D3（100nmol/L）干预组、 LPS＋1,25（OH）₂D₃（100nmol/L）干预组、25（OH）D（3100nmol/L）干预组、1,25（OH）2D（3100nmol/L）干预组分组；再次，按照1,25（OH）₂D₃（100nmol/L）的不同干预时间点（LPS刺激前24小时、LPS刺激前16小时、LPS刺激前6小时、LPS刺激前3小时、同时给药、LPS刺激后3小时、LPS刺激后6小时）分组；最后，按照1,25（OH）₂D₃的不同给药浓度（10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L）分组；以LPS的给药时间为起点，24小时后收集细胞培养上清。另外，给予1,25（OH）₂D₃（1μmol/L）干预，分别于LPS刺激6小时、12小时后收集细胞培养上清。通过酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测细胞培养上清中炎症因子白介素（interleukin，IL）-8的表达水平。2.按照对照组、LPS刺激组（1μg/ml）、LPS＋1,25（OH）₂D₃（10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L）干预组分组；于LPS刺激A549细胞24小时后应用MTT法检测细胞增殖活力。3．应用免疫组化、免疫荧光方法检测人正常肺组织中ATⅡ及A549细胞维生素D受体（vitamin D receptor，VDR）、1-羟化酶（CYP27B1）的表达分布。4.按照对照组、LPS刺激组、LPS＋1,25（OH）₂D₃（1μmol/L）干预组、1,25（OH）₂D₃（1μmol/L）干预组分组，在LPS刺激30分钟和24小时后收集细胞提取总蛋白，应用Western Blot方法检测NF-κB p65、IκB-蛋白的表达水平；应用免疫荧光方法检测NF-κB p65的表达及核转位。结果：1.1,25（OH）₂D₃可显著降低A549细胞经LPS刺激后炎症因子IL-8的表达水平（P<0.05），而25（OH）D3仅轻度降低IL-8的表达水平，且无统计学差异；1,25（OH）₂D₃在七个不同干预时间点均可显著降低炎症因子IL-8的表达水平（P<0.05），其中在LPS刺激前24小时给药最为明显；三个不同给药浓度的1,25（OH）₂D₃均可显著降低炎症因子IL-8的表达水平（P<0.05），其中高浓度组最为明显；1,25（OH）₂D₃在LPS刺激后6小时及12小时两个时间点均可显著降低炎症因子IL-8的表达水平（P<0.05）。2. LPS（1μg/ml）组细胞增殖活力较对照组明显下降（P<0.05），在LPS刺激前24小时给予1,25（OH）₂D₃（10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L）干预与LPS刺激组比较未显著影响细胞增殖活力。3．VDR和CYP27B1在人正常肺组织ATⅡ中均有表达，VDR表达于胞核和胞浆处，CYP27B1主要表达于细胞浆。与正常ATⅡ有所不同，A549细胞的VDR主要表达于核膜和胞浆处，并且在A549细胞中未检测到CYP27B1的表达。4．1,25（OH）₂D₃在30分钟和24小时可显著升高A549细胞和经LPS刺激后A549细胞IκB-总蛋白的表达水平，而对NF-κB p65总蛋白的表达水平无显著影响；免疫荧光检测显示1,25（OH）₂D₃可抑制LPS刺激后A549细胞NF-κB p65的核转位。结论：1．1,25（OH）₂D₃可显著抑制LPS致伤A549细胞炎症因子IL-8的表达，抑制程度随给药浓度的增加而增强，并且在LPS刺激前24小时干预时其抗炎作用效果最为明显。2．1,25（OH）₂D₃对LPS致伤A549细胞的增殖活力无显著影响。3．VDR和CYP27B1在人正常肺组织ATⅡ中均有表达，提示正常ATⅡ具有局部合成1,25（OH）₂D₃的可能，而A549细胞仅表达VDR，未检测到CYP27B1的表达，这可能是给予25（OH）D3不能在A549细胞局部经CYP27B1催化为1,25（OH）₂D₃，而发挥抗炎作用的原因之一。4．1,25（OH）₂D₃可能通过上调IκB-蛋白的表达，抑制NF-κB p65的核转位，进而使其下游炎症因子IL-8的表达下调，从而发挥抗炎作用。