近年来,肿瘤免疫疗法备受关注,以肿瘤免疫检查点疗法为代表的免疫治疗在临床上获得了巨大的成功。然而免疫检查点疗法亦存在响应率低的问题,患者获益有限。免疫治疗受限于肿瘤微环境的复杂性和异质性。在肿瘤组织中除了肿瘤细胞,还包括基质细胞、炎症细胞、脉管系统和细胞外基质等,形成了复杂的肿瘤微环境。肿瘤微环境中的各种组分受到肿瘤细胞的影响,改变维持自身生存和发展的条件,促进肿瘤的生长、发展和转移,肿瘤微环境常常处于免疫抑制状态,导致机体免疫系统抗肿瘤作用低下。同时,由于肿瘤细胞对免疫细胞的“驯化”作用,被募集的免疫细胞会演化成肿瘤的“帮凶”,形成具有免疫抑制或逃逸特征的肿瘤微环境。例如,肿瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAM)数量丰富,同时肿瘤细胞通过有氧糖酵解产生的免疫抑制代谢物乳酸诱导肿瘤相关巨噬细胞向抑炎表型极化,进一步加速肿瘤的生长。因此,通过抑制糖代谢和乳酸产生,重构肿瘤免疫微环境(Tumor Immune Microenvironment,TIME)是解除免疫抑制、实现免疫正常化的重要策略,对于肿瘤的免疫治疗具有重要意义。目的:本研究通过制备仿生靶向共载药纳米系统,促进肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡来引起肿瘤免疫反应,并通过调控肿瘤免疫微环境和代谢来解除免疫抑制,从而增强抗肿瘤作用。方法:本课题通过热驱动自组装方法制备了一种甘露糖苷(Mannose)修饰的乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)纳米给药系统(Man-LFNPs),可同时靶向肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞。该纳米粒共载紫草素和JQ1,通过引起肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡,并抑制肿瘤糖酵解活性来协同抑制肿瘤生长,同时该纳米系统可促进M2型肿瘤相关巨噬细胞重极化成M1型,提高树突状细胞的抗原呈递功能,通过重塑肿瘤免疫微环境来解除免疫抑制,实现免疫正常化。结果:1、合成了甘露糖修饰乳铁蛋白(Man-LF)。通过热驱动自组装的方法构建了 LF NPs和Man-LFNPs,并对两种纳米粒进行粒径、电位、PDI、载药量、包封率、体外释放及稳定性的考察,实验结果表明,两种纳米粒粒径均匀,均为150 nm左右,形貌规则成圆球形,稳定性良好。2、细胞实验结果表明,Man-LF NPs可以显著提高结肠癌CT26肿瘤细胞的摄取效率,并可诱发免疫原性细胞死亡,抑制肿瘤细胞糖酵解及乳酸产生,该纳米系统还可以重极化M2型肿瘤相关巨噬细胞,激活树突状细胞,抑制肿瘤细胞上PD-L1的表达。3、体内动物实验结果表明,所构建的纳米系统具有高效的肿瘤靶向性,可抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,延长荷瘤小鼠生存时间,并对体内抗肿瘤作用机制进行研究,实验结果与体外研究一致,表明了该纳米递药系统具有调控肿瘤免疫微环境,来发挥免疫治疗的作用。结论:紫草素可引起肿瘤细胞发生免疫原性细胞死亡,抑制肿瘤细胞糖酵解功能。共载紫草素和JQ1的乳铁蛋白双靶向纳米粒具有调控肿瘤免疫微环境及糖代谢的能力,增强肿瘤免疫治疗的作用,实验结果表明所构建的纳米载药系统具有潜在的肿瘤治疗价值。