【摘 要】
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本文主要研究了以甘油为底物进行微生物发酵制取1,3-丙二醇的菌种筛选改良及其发酵工艺优化,形成了一套高产高效的发酵控制策略。发酵菌株为兼性厌氧的克雷伯氏菌,底物为甘油
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本文主要研究了以甘油为底物进行微生物发酵制取1,3-丙二醇的菌种筛选改良及其发酵工艺优化,形成了一套高产高效的发酵控制策略。发酵菌株为兼性厌氧的克雷伯氏菌,底物为甘油。出发菌株在紫外诱变的基础上,实施与厌氧、好氧的摇瓶培养相耦联的筛选优化策略,同时改变培养的底物、产物等条件来实现菌体发酵性能的提高与稳定。通过反复培养优化,挑选出一株理想的发酵出发菌种,解决了菌种耐受高底物和高产物浓度的能力偏低的问题。并实现了菌株的快速生长与产物的生产。在与pH控制相耦联的底物流加控制策略基础上,对克雷伯氏菌进行15L罐厌氧发酵实验,对发酵过程进行了优化。考察了添加代谢中间物对发酵效能的影响,在外源添加延胡索酸等有机酸情况下,菌体的发酵效能有所提高。同时针对克雷伯氏菌发酵生长的特点,考察了发酵过程中醇水平控制对发酵效能的影响。在这些工艺控制策略情况下,最终1,3-丙二醇的质量体积累积浓度达到80 g/L以上;1,3-丙二醇对所消耗甘油的摩尔转化率也超过了65%,明显优于其他发酵策略下所获得的发酵结果。菌体的整体生产能力得到了较大提高,从而为微生物发酵甘油制取1,3-丙二醇的工业化奠定了坚实基础。
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