重组hIL-24及Ad-IL-24联合顺铂对A549细胞体内外生长的影响

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目的①探讨IL-24蛋白和基因联合顺铂体外对人肺腺癌A549细胞株、A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞株的抑制效应;②探讨IL-24蛋白和基因联合顺铂体外诱导人肺腺癌A549细胞、A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞凋亡和细胞周期及凋亡基因的变化;③探讨Ad-IL-24基因联合顺铂对裸鼠肺癌移植瘤体内生长影响。方法①用rhIL-24、DDP及rhIL-24+DDP作用于A549细胞、A549/DDP细胞,用Ad-IL-24、DDP及Ad-IL-24+DDP作用于A549细胞、A549/DDP细胞,抑制细胞生长;②用CCK-8法检测A549细胞、A549/DDP细胞增殖,计算抑制率;③用流式细胞仪检测A549细胞、A549/DDP细胞凋亡及细胞周期的变化;④用多基因遗传表达分析A549细胞、A549/DDP细胞凋亡多基因的变化;⑤用活体成像技术观察裸鼠肺癌移植瘤体内生长。结果①A549细胞、A549/DDP细胞在适宜培养下于第2天进入对数生长期;②rhIL-24蛋白能抑制人肺腺癌A549及A549/DDP细胞生长,抑制率分别为24%、19%,对正常细胞无毒性;联合DDP组抑制率分别为32%、25%,优于单独用药组,rhIL-24蛋白具有化疗增敏效应;③流式细胞仪检测rhIL-24、DDP和rhIL-24+DDP各组凋亡率与阴性对照组比较具有显著性差异;细胞周期检测中,rhIL-24作用A549细胞24h后S期增多、rhIL-24作用A549/DDP细胞24h后G2/M期增多;④rhIL-24蛋白对于肺腺癌A549及A549/DDP具有上调Bax,下调Bcl-2,下调survivin,激活caspase3,上调抑癌基因Rb等凋亡相关基因,联合DDP组其作用更加显著;⑤Ad-IL-24能抑制人肺腺癌A549细胞的生长,且联合用药之后细胞生长抑制率明显优于单独用药组,Ad-IL-24具有化疗增敏效应;⑥Ad-IL-24能抑制A549裸鼠人肺腺癌移植瘤生长,在肿瘤早期其抑制作用更加明显;Ad-IL-24联合DDP后治疗效果优于单独用药组,呈现出明显的化疗增敏效应;Ad-IL-24能诱导A549裸鼠人肺腺癌移植瘤细胞凋亡;⑦多功能活体成像仪对小鼠肺癌移植瘤可进行肿瘤生长活体状态下的动物体内肿瘤生长定性与定量的研究,不损伤动物进行动态观察。结论①IL-24及Ad-IL-24能抑制A549、A549/DDP田胞体内外生长,联合DDP组效果优于单独用药组,具有化疗增敏效应; IL-24及Ad-IL-24能诱导A549细胞凋亡和影响细胞周期;同时发现细胞凋亡有多基因的变化;②多功能活体成像仪对小鼠肺癌移植瘤可进行肿瘤生长活体状态下的动物体内肿瘤生长定性与定量的研究。
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