长链非编码RNA HOTAIR驱动食管癌恶性表型及作为临床预后判断标志的研究

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lihaolong2005
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目的:长链非编码RNA HOTAIR表达于HOXC基因簇上,先前的研究表明它能够同时结合PRC2复合体和LSD1-CoREST-REST复合体从而参与染色质结构的调控,并能调控促进肿瘤侵袭转移相关的基因表达。临床研究表明,在多种肿瘤的发生发展中,HOTAIR的过表达可以作为一个预示肿瘤进展和病人预后的有力的标志:然而,HOTAIR在食管癌中的表达与病人预后及其调控的分子机制仍不清楚,所以本研究旨在研究HOTAIR在食管癌中的功能和意义。方法:我们使用实时定量PCR的方法在100例食管癌标本,56例非配对的正常食管组织标本及食管癌肿瘤细胞系中检测HOTAIR的表达水平;在本研究中进行以下实验,包括细胞克隆形成实验、非依赖锚着克隆生长实验、CCK-8实验、Transwell细胞侵袭实验、Annexin V细胞凋亡等实验来研究过表达和抑制HOTAIR对食管癌细胞的生物学行为的影响;应用裸鼠来研究HOTAIR的表达水平对食管癌细胞的体内成瘤的影响;应用基因表达谱芯片和人类甲基化芯片来研究HOTAIR在食管癌细胞中参与基因表达调控及相应的甲基化改变情况。结果:与正常食管组织相比,HOTAIR的表达水平在食管癌组织和食管癌细胞系中呈现高表达且HOTAIR的表达水平与病人的疾病分期和生存时间具有相关性;在KYSE510和KYSE180细胞中.用小干扰RNA抑制HOTAIR的表达能够显著抑制细胞的增殖、侵袭转移、细胞周期进程并能增加细胞对凋亡的敏感性;在裸鼠中,抑制HOTAIR同样可以抑制肿瘤的生长和转移。基因芯片研究表明HOTAIR在食管癌细胞中参与调控一系列基因的表达,基因功能分析表明这些基因在肿瘤发生发展中具有重要的作用,包括涉及细胞侵袭、细胞周期调控。比较基因表达谱和基因的甲基化谱显示在食管癌中HOTAIR调控的基因表达中,只有一小部分是由于HOTAIR改变了基因的甲基化状态所导致的。结论:HOTAIR的表达在食管癌中显著上调,且HOTAIR促进食管癌细胞的增殖、侵袭转移。HOTAIR参与一系列调控肿瘤发生的基因的表达:这些数据表明HOTAIR在食管癌的发生发展中起到关键作用,有可能作为食管癌预后判断和治疗的一个新的表观标志。
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