铁是生物体不可或缺的金属元素,在DNA合成、细胞分裂等生物过程中发挥重要作用。然而,生物体内游离的铁含量异常增高则会诱发芬顿反应（Fenton reaction）,即诱导H₂O₂产生羟基自由基（·OH）,对机体造成氧化损伤。铁蛋白（ferritin）是生物体内储存铁的蛋白质,在维持体内铁稳态和免疫防御中发挥重要作用。铁蛋白含量变化可以衡量机体对外界胁迫环境的反应程度。家蝇生活周期短、抗病抗逆能力强,已经成为研究昆虫先天免疫的理想模式生物。本实验室前期对家蝇铁蛋白基因（MdFers）进行了克隆和原核表达,并对其组织分布和应对细菌刺激的表达模式进行了初步探究。本文在上述研究基础上,对家蝇铁蛋白在免疫方面的功能以及转铁蛋白（transferrin）在体内铁平衡中发挥的作用进行探究,研究内容如下:1、通过Western blot技术对家蝇MdFerH和MdFerL在氧化应激条件下的表达模式进行分析,发现机体在遭受氧化应激时显著上调铁蛋白表达。2、通过注射dsRNA成功干扰了家蝇幼虫体内MdFers的表达。结果显示,敲低MdFers表达会引起家蝇体内氧化应激反应,机体抵抗细菌侵染能力明显下降。3、利用构建的MdFers原核表达系统来探究家蝇铁蛋白对抗氧化应激的能力,发现表达家蝇铁蛋白能有效提高宿主菌对H₂O₂的抗性。4、通过PCR和RACE技术（Rapid-amplification of cDNA ends）获得了家蝇转铁蛋白基因的全长cDNA序列,并将其命名为MdTf。该序列包含一个1128 bp的完整开放阅读框（Open Reading Frame）,编码375个氨基酸,MdTf蛋白的理论分子量为42.8 kDa。对MdTf进行保守结构域预测,结果显示其存在转铁蛋白结构域,属于转铁蛋白超家族成员。通过原核表达得到了纯化的家蝇转铁蛋白,可为后续探究转铁蛋白功能奠定基础。