论文部分内容阅读
番石榴叶作为中外民间医药治疗糖尿病和腹泻等疾病有广泛的应用,番石榴叶酚类成分是番石榴叶的主要活性成分,含有许多结构新颖的酚类成分,大量研究表明番石榴叶酚类成分具有降血糖、抗氧化、抗癌和抗病原微生物的作用。目前番石榴叶中活性成分的分离、分析方法并不完善,建立一套快速高效的分离纯化及分析方法具有重要意义。本研究采用高速逆流色谱和半制备高效液相色谱相结合的方法,可从番石榴叶中分离得到多种酚类化合物单体。并采用高效液相色谱对番石榴叶乙酸乙酯提取物的黄酮苷类进行含量测定。本论文包括三部分：1综述概述了番石榴叶化学成分、药理作用及黄酮类化合物的制备分离,总结了高速逆流色谱法分离黄酮类化合物常用溶剂体系的选择。番石榴叶主要含有酚酸类、黄酮类、萜类以及挥发油类成分,具有降血糖、止泻、保肝、抗氧化、抗病原微生物和抗癌作用,目前主要应用大孔树脂、硅胶、凝胶、反相硅胶及制备液相对番石榴叶黄酮类化合物进行分离,主要采用溶剂系统正已烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系、石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水体系、氯仿-甲醇-水体系、正已烷-氯仿-甲醇-水体系、乙酸乙酯-甲醇-水体系、乙酸乙酯-正丁醇-水体系的高速逆流色谱法对黄酮类化合物进行分离纯化。2番石榴叶酚类成分的提取和分离建立了两相溶剂系统正已烷-乙酸乙酯-甲醇-水,以(0.7:4:0.8:4, v/v/v/v)配比溶的高速逆流色谱法从乙酸乙酯提取物中分离制备金丝桃苷和异槲皮苷混合物、瑞诺苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、2,4,6-三羟基-3,5-二甲基二苯甲酮4-O-(6”-O-没食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷的方法；采用制备型高效液相色谱将金丝桃苷和异槲皮苷混合物分离得到金丝桃苷和异槲皮苷。采用溶剂系统石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1：1：1：1,v/v/v/v)从正已烷-乙酸乙酯-甲醇-水(0.7:4:0.8:4, v/v/v/v)未能洗脱的样品中分离制备得到槲皮素和psidials C.3番石榴叶乙酸乙酯提取物中5种黄酮苷的含量测定建立采用Syncronis C18色谱柱(4.6mmx250mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水梯度洗脱,流速1.0mL.min-1,检测波长254nm,柱温40℃的高效液相色谱法测定番石榴叶提取物中金丝桃苷,异槲皮苷,瑞诺苷,槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷,槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷的多成分的含量测定方法。本实验室所提番石榴叶提取物中金丝桃苷,异槲皮苷,瑞诺苷,槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷,槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷的含量范围为0.873～5.668mg/g,1.094～5.691mg/g,3.582～16.180mg/g,2.239～14.026mg/g,4.244～13.027mg/g.