【摘 要】
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目的:通过抑制NLRP3炎症小体,观察坐骨神经慢性压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠机械痛敏变化,探讨NLRP3炎症小体对神经病理性疼痛的影响及机制。方法:S
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目的:通过抑制NLRP3炎症小体,观察坐骨神经慢性压榨性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠机械痛敏变化,探讨NLRP3炎症小体对神经病理性疼痛的影响及机制。方法:Sprague-Dawley雄性大鼠36只,8周龄,体重250~300 g,随机分为4组(n=9):假手术组(control组)、慢性坐骨神经压榨性损伤组(CCI组)、溶剂对照组(CCI-vehicle组)和抑制剂组(CCI-MCC950组)。分别于建模前1 d、建模后1、4和7 d测定机械缩足反应阈(MWT);CCI-vehicle组和CCI-MCC950组于建模后4d测定MWT后分别鞘内注射等容积生理盐水和MCC950溶液,每天1次,连续3天;于建模后7 d MWT测量后处死大鼠取L4-6脊髓组织,采用Western blot法测定脊髓组织NLRP3、ASC、caspase-1及IL-1β蛋白表达,采用实时荧光定量PCR法测定脊髓组织NLRP3、ASC、caspase-1及IL-1βm RNA表达,采用Td T介导d UTP末端标记法(Td T-mediated d UTP Nick-End Labeling,TUNEL)检测脊髓组织凋亡细胞,采用免疫荧光双标法观察脊髓组织NLRP3与GFAP共表达。结果:与control组比较,CCI组、CCI-vehicle组和CCI-MCC950组MWT显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β蛋白和m RNA表达上调(P<0.05),凋亡阳性细胞数升高(P<0.05);与CCI组、CCI-vehicle组比较,CCI-MCC950组经MCC950处理后MWT升高(P<0.05),且脊髓组织NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β蛋白和m RNA表达下调(P<0.05),凋亡阳性细胞数减少(P<0.05)。免疫荧光双标结果显示:NLRP3蛋白主要表达于脊髓星形胶质细胞和神经元胞浆。结论:NLRP3炎症小体在神经病理性疼痛大鼠脊髓中活化,抑制该炎症小体能一定程度改善CCI模型大鼠机械痛敏;NLRP3炎症小体参与促进大鼠神经病理性疼痛的发展,其机制可能与脊髓星型胶质细胞活化导致免疫炎症反应和神经元凋亡有关。
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