软组织肉瘤DCE-MRI与其病理学MVD、VEGF的相关研究

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目的:探讨软组织肉瘤DCE-MRI成像特征与其组织病理MVD及VEGF的相关性。材料与方法:一、病例资料:收集2013年3月至2014年1月在我院手术治疗的软组织肉瘤患者30例,年龄18-80岁,平均52.6岁。所有病例均签署知情同意书,在检查前未进行病理活检及任何临床治疗。二、MR扫描定位、技术与图像后处理(一)MR扫描定位:扫描前患者卧于检查床,垂直检查床于体表肿物区域画出与零点定位线重叠的标记线(标线1),然后行横断面进行常规与动态增强扫描。扫描结束后利用Functool软件找出肿瘤强化最明显处并根据层厚算出距标线1的距离,并于患者体表处画出此标记线(标线2)。(二)MR技术:对30例软组织肉瘤患者分别行常规扫描和DCE-MRI扫描,其中DCE-MRI扫描使用二维快速扰相梯度回波序列(2D FSPGR),对比剂使用Gd-DTPA(0.lmmol/kg),无间断扫描16个时相。(三)图像后处理:应用GE ADW4.5工作站的Functool软件,观察强化形态学特征,分析不同时相感兴趣区的时间-信号强度曲线(Time intensitycurve,TIC)、MRI强化形式及各项量化参数。三、标本获取与组织切片的制备(一)标本获取:术中:沿标线2切开,用慕斯线沿此线打3个结确定一个平面,取出肿物后,在肿物前后左右分别标记不同根数的慕丝线以区分方位。(二)组织切片的制备:由病理科医生协助,沿标线2所确定的面切开,取出肿瘤组织,对照DCE-MRI图像,找出最强化处的点距某两个方向的距离并切出瘤体,制作蜡块及常规制片,HE染色。四、免疫组化免疫组化采用MaxVision一步法。即用型CD34鼠抗人单克隆抗体;兔抗人血管内皮生长因子单克隆抗体;即用型快捷免疫组化MaxVisionT M检测试剂盒;所用试剂购于北京中杉金桥生物技术公司。免疫组化染色过程由病理科医师指导完成。五、观察指标(一) STSs的TIC类型:30例STSs病灶的TIC分为四种类型,I型(平坦型)、II型(缓慢上升型)、III型(速升平坦型)、IV型(速升下降型);(二) STSs的DCE-MRI参数:信号增强幅度(Signal Enhanced Extent, SEE)、最大上升斜率(Maximum Slope ofIncrease, MSI)、相对最大上升斜率(the relativeMaximum Slope of Increase, rMSI)、信号增强比率(Signal Enhancement Ratio, SER)、相对信号增强比率(the relative Signal Enhancement Ratio, rSER)、峰值信号强度(Signal Intensity of Peak, SIpeak)、达峰值时间(Time of Peak, Tpeak)、达峰时间差(△Tpeak);(三) MVD、VEGF:MVD计数先在低倍镜(x40)下寻找血管密集区,再在高倍镜(x400)下对血管数目进行计数,采用Weidner法进行MVD计数;VEGF的表达评判采用许良中方法,将着色强度的记分与着色细胞占细胞总数的比例的记分相乘,根据得到的分值分成四种表达水平(-、+、++、+++)。六、MRI-病理对照在准确的扫描定位、术中标记及病理医师严格取材的前提下,应用Functool自动分析软件,可以得到各期增强图像、MSI及SER的伪彩图、TIC类型,可以对TIC与免疫组化指标CD34、VEGF分别进行对照观察。七、统计学分析:对30例STSs的全部数据应用SPSS统计学软件(19.0版本)分析:(一)对30例STSs的TIC类型与MVD的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法;(二)对30例STSs的TIC类型与VEGF表达水平相关性分析采用Kendall,s tau-b等级相关分析;(三)对30例STSs不同VEGF表达水平与MVD的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法;(四)对30例STSs的DCE-MRI参数与MVD的相关性分析采用Pearson相关分析;(五)对30例STSs的DCE-MRI参数与VEGF表达的相关性采用Spearman相关分析。结果:一、30例STSs的TIC类型与MVD比较:30例STSs中,其中7例表现为II型,MVD平均值为14.11±3.22,13例表现为III型,MVD平均值为19.03±3.65,10例表现为IV型,MVD平均值为25.26±8.99,三组间MVD值差异有显著性(P=0.002),II型与IV型的MVD值存差异有显著性(P=0.001),III型与IV型MVD值差异有显著性(P=0.019),II型与III型的MVD值差异无显著性(P=0.088);二、30例STSs的TIC类型与VEGF表达水平的相关性:TIC类型和VEGF表达水平呈正相关(P=0.007);三、30例STSs的不同VEGF表达水平与MVD比较:MVD在不同VEGF表达水平下差异有显著性(P=0.006),两两比较得到VEGF表达水平为‐与+++的MVD值差异有显著性(P=0.001),VEGF表达为+与+++的MVD值差异有显著性(P=0.002),VEGF表达为++与+++的MVD值差异有显著性(P=0.01);四、30例STSs的DCE-MRI参数与MVD相关性:rMSI与MVD正相关(p<0.001);其余MSI、SER、rSER、SEE、Tpeak、△Tpeak、SIpeak与MVD均无相关性;五、30例STSs的DCE-MRI参数与VEGF表达的相关性:MSI、rMSI、SER、rSER、SEE、Tpeak、△Tpeak、SIpeak与VEGF表达均无相关性。结论:1. STSs的TIC类型可以反映其MVD的计数及VEGF表达;2. STSs的DCE-MRI参数rMSI与MVD呈正相关,即随着rMSI增高,其肿瘤MVD计数增加;DCE-MRI参数MSI、SER、rSER、SEE、Tpeak、△Tpeak、SIpeak与MVD无相性;3.STSs的DCE-MRI参数MSI、rMSI、SER、rSER、SEE、Tpeak、△Tpeak、SIpeak均与VEGF表达无相关性。
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