土霉素在蜜蜂体内的药物代谢动力学研究

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本研究为,在室内人工饲养蜜蜂工蜂的条件下进行的成年蜂药物代谢动力学研究。试验一,蜜蜂工蜂的人工饲养:在室内使用恒温箱饲养刚出房的成年工蜂。选择3种不同的饲育温度:28℃、31.5℃、35℃,4种不同的饲料:炼糖、蜂蜜、炼糖+花粉、蜂蜜+花粉,分别组合成12个处理组,以期得出在饲喂35d后成活率仍有30%以上的结果。实验结果显示,饲育温度为35℃,饲料为炼糖+花粉的处理组,饲养效果最好,成活率最高,饲养40d后平均成活率还保持在在30%以上。试验二是选择试验一的最好饲养条件,对刚出房的单只成年工蜂进行逐只口灌给药,间隔一定时间后采取血淋巴和王浆腺,采用液相色谱串联质谱仪法,测定土霉素在蜜蜂血淋巴和王浆腺中的药物浓度代谢动力学。每只蜜蜂给药的土霉素剂量为4.464μg,喂药后,每3小时采集一次蜜蜂血淋巴,每24小时采集一次蜜蜂王浆腺,样本处理后,用液相色谱串联质谱法进行检测;用3P97药物代谢动力学软件对检测出来的二组数据分别进行分析,得出药代动力学参数。试验结果表明:土霉素在蜜蜂的血淋巴和王浆腺的药时曲线符合开放性房室模型,血淋巴和王浆腺的药时曲线面积AUG分别为178346.484mg·h-1、150.745mg·h-1;在血淋巴和王浆腺中的消除半衰期T1/2分别8.657h、13.568h;消除速率常数Ke分别为0.08/h、0.051/h。根据最大药物浓度计算,药物从血淋巴转移到王浆腺的转运率为24.3%。根据2009年6月补充修订的食品安全检测中土霉素在蜂蜜、蜂王浆中的检测中的日本限量标准,在土霉素对蜂群用药后,蜜蜂体内土霉素代谢的休药期的理论值为3d。但蜂群试验表明,由于蜂群用药的特殊性,蜂群喂药后,由于蜜蜂持续接触药物,休药期要45d,才能使蜂蜜中的药物残留降至标准之下。试验三是蜂群里蜜蜂体内头部腺体和王浆腺的药物代谢动力学研究:选取一群10足框蜜蜂,饲喂含125mg土霉素的糖浆(糖:水=1:1),分别在第一天、第三天、第五天、第六天、第八天、第十天、第十五天、第二十天取蜜蜂头部通过液相色谱串联质谱仪法进行检测,王浆为三天取一次,取七次通过液相色谱串联质谱仪法检测,结果发现:在蜜蜂头部腺体中,蜜蜂体内的残留量在前五天都几乎检测不出,而后面的残留量浓度也起伏不定,没多大规律,最高检测浓度为第15d,浓度为55.281ppb,个体残留量为22.112ppb;在蜜蜂王浆中,最高检测浓度为第1次,即为第三天,浓度为184.973ppb,每克王浆中残留量为246.631ppb。
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