目的：（1）根据CD138、CD10、Bcl-6、MUM1的表达，以四种不同免疫分型方法将弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)分成不同亚型,研究不同分型方法在患者临床诊疗及预后评价中的意义，评价其对国内病例的适用性。（2）比较常规聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR）法、荧光原位杂交法（Fluorescence in situhybridization, FISH）在检测t(14;18)易位时的应用价值，探讨t(14;18)易位与不同蛋白表达、免疫分型、临床因素的关系。（3）研究MYC基因重排在中国人群DLBCL中的发生情况，评价其在弥漫大B细胞淋巴瘤治疗、预后评估中的意义及具有t(14;18)易位、MYC基因重排双阳性患者临床特征。方法：（1）收集2000-2007年山西省肿瘤医院病理科确诊为DLBCL的病例106例，随访所有患者。另取10例反应性滤泡增生(reactive follicle hyperplasia，RFH)病例，石蜡标本制作组织芯片。利用免疫组织化学EnVision法检测CD138、CD10、MUM1、Bcl-6、Bcl-2及Ki-67的表达情况。根据免疫标记结果，构建4种不同免疫分型方法。将肿瘤分为不同免疫学亚型，观察抗原表达、不同免疫学亚型与预后的相关性，探索更适合于中国人群的免疫学分型方法；（2）对106例DLBCL患者石蜡组织标本分别采用传统PCR及FISH法检测t(l4;18)易位，PCR法以看家基因β-Actin作为内对照检测DNA质量，根据Bcl-2基因两个主要断裂点MBR、mcr设计两对引物进行扩增;FISH法采用IGH/BCL2融合探针完成。（3）FISH技术对106例DLBCL石蜡组织切片中MYC基因重排进行检测，比较MYC基因重排和抗原表达、免疫学亚型及预后的相关性。（4）统计分析采用SPSS13.O软件进行。生存曲线分析采用Kaplan-Meier法,单因素生存曲线比较采用log-rank检验，预后多因素分析采用Cox比例风险模型，样本例数较少时采用Fisher精确概率法，计数资料采用χ~2检验。总生存期(overallsurvival，OS)的计算从诊断确立到淋巴瘤引起的死亡,或随访的终止,与本病不相关的死亡算为截尾。无进展生存期(progression free survival，PFS)的计算从诊断确立到肿瘤复发、转移或病情恶化。结果：(l) DLBCL中CD138、MUM1、CD10及Bcl-6阳性率分别为15.1%、56.6%、21.7%、26.4%、73.6%。其中CD10和Bcl-6阳性者预后较好(OS, p=0.001和0.041),而CD138阳性者预后较差(OS,p=0.003)。单因素分析，ECOG≥2分,血清LDH≥240IU/L,B症状, AnnⅢ～Ⅳ期，IPI≥3分，CD138阳性表达均与不良预后相关。多因素COX分析，方法1和方法4相对于OS,进行预后评估时相对危险度（relative risk，RR）分别为0.259、0.255；相对于PFS，RR值分别为0.248、0.244。在统计学上达到相对重要的水平，两种分型方法相对于OS、PFS预后评估时RR值接近。（2）PCR检测106例DLBCL石蜡组织标本t(l4;18)易位时，98例（92.5%）可检出GAPDH基因DNA存在，16例(15.1%)可检测出t(l4;18)易位。FISH操作中，106例标本中t(14;18)易位阳性者27例（25.5%），包括16例PCR检测阳性病例。79例FISH检测阴性组中，PCR法检测均为阴性。统计学分析示检测石蜡包埋组织t(14;18)易位时，FISH法明显优于PCR方法（p＜0.001）。根据Hans等免疫分型方法分为GCB型（26例）和non-GCB型（80例），t(14;18)易位在GCB型发生率显著高于non-GCB型（p<0.001）。23例CD10阳性组中有14例发生t(14,18)易位，83例CD10阴性组中有13例易位阳性，t(14,18)易位与CD10表达相关，（p<0.001）。t(14,18)易位与Bcl-6、MUM1、Bcl-2三者表达无关。生存分析示，t(14;18)易位阳性者预后差于阴性者。易位中位生存时间（相对于OS，18.5月；相对于PFS，11.0月），未发生易位者中位生存时间（相对于OS，40.0月；相对于PFS，35.3月）。（3）106例患者中MYC基因重排13例（12.3%），有7例存在t(14;18)易位，93例重排阴性的病例中，20例存在t(14;18)易位，MYC重排与t(14;18)易位相关（p=0.03）。生存分析示，MYC重排阳性者预后明显差于阴性者（OS,p=0.001；PFS,p＜0.001）,MYC重排阳性组中位生存时间（相对于OS=4.7月，相对于PFS=3.2月），阴性组中位生存时间（相对于OS=43月，相对于PFS=37.5月）。虽然MYC重排与t(14;18)易位双阳性患者病例数太少无法进行进一步统计学分析，但7例双易位患者中位OS＝4月，PFS=1.5月，均比单独MYC重排阳性组生存时间短。结论：（1）弥漫大B细胞淋巴瘤中，CD138表达与不良预后有关，CD10和Bcl-6阳性表达者预后相对较好。方法1和4预后意义相似，在预后分析中优于方法2和3，可以识别部分高危患者,在本组病人中更具有临床适用性。（2）FISH能检测到所有BCL2基因上的断裂点，与传统的标准PCR相比大大提高检测效率。Bcl-2蛋白表达受多种调控因素影响，Bcl-2蛋白表达与t(14;18)易位无关，另有其它调控机制存在。t(14;18)易位主要存在于GCB亚型中，与不良预后相关，有助于识别GCB型中预后较差的病例。（3）MYC基因重排与免疫学亚型无关，与t(14;18)易位相关，遗传学改变t(14;18)易位与MYC基因重排双阳性患者预后极差，以传统CHOP方案化疗，多数患者无法获得肿瘤缓解，以利妥昔单抗为代表的靶向治疗联合传统化疗或移植联合新的药物组成方案在内的治疗措施可能对这部分患者更适用。