目的:研究雷帕霉素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠脾组织中Th17细胞比例及HIF-1α、GLUT1表达水平的影响,初步探讨雷帕霉素对EAE小鼠的免疫调节作用和对Th17细胞分化的影响,以进一步阐明雷帕霉素的可能作用机制,为指导临床用药提供基础实验依据。方法:将C57BL/6小鼠随机分为Rapa组、EAE组和正常对照组,以MOG35-55为抗原免疫建立EAE模型,正常对照组不予免疫。免疫当天记为第0天,自免疫第1天开始给药,Rapa组小鼠给予雷帕霉素1mg/kg每日腹腔注射;正常对照组及EAE组小鼠每日给予等量生理盐水腹腔注射。观察小鼠的发病情况、体重变化及神经功能评分。于免疫后第20天处死小鼠。以HE染色观察小鼠脊髓组织炎性细胞浸润情况;流式细胞术检测小鼠脾组织Th17细胞比例;ELISA检测小鼠脾细胞培养液上清液中IL-17A表达水平;Real-Time PCR测定小鼠脾组织HIF-1α及GLUT1 mRNA的表达水平。结果:1各组小鼠临床表现:正常对照组小鼠无发病;Rapa组小鼠与EAE组小鼠相比,其发病率、体重减轻程度及免疫后第20天的神经功能评分均明显降低(P<0.05)。2各组小鼠脾组织中Th17细胞比例比较:免疫后第20天,EAE组Th17细胞比例较正常对照组明显升高(P<0.05),Rapa组Th17细胞比例较EAE组明显降低(P<0.05)。3各组小鼠脾细胞培养液上清液中的IL-17A浓度比较:免疫后第20天,EAE组小鼠脾细胞培养液上清液中的IL-17A浓度较正常对照组明显升高(P<0.05),Rapa组小鼠脾细胞培养液上清液中的IL-17A浓度较EAE组明显降低(P<0.05)。4各组小鼠脊髓组织HE染色光镜下炎性病灶数比较:免疫后第20天,EAE组小鼠脊髓组织炎性病灶数较正常对照组明显升高(P<0.05),Rapa组小鼠脊髓组织炎性病灶数较EAE组明显减少(P<0.05)。5各组小鼠脾组织中HIF-1α及GLUT1 mRNA含量比较:免疫后第20天,EAE组小鼠脾组织中HIF-1α及GLUT1 mRNA与正常对照组相比表达明显增多(P<0.05),Rapa组小鼠脾组织中HIF-1α及GLUT1 mRNA与EAE组相比表达明显降低(P<0.05)。结论:1雷帕霉素通过抑制Th17细胞生成及相关促炎因子IL-17A分泌而起到对EAE的保护作用。2雷帕霉素对Th17细胞的调节作用和对EAE的保护作用是通过mTOR/HIF-1α通路起作用的。