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目的:探讨尿酸对肝细胞氧化应激及线粒体功能的影响。方法:体外培养人肝细胞(L-02),分别加入0、5、10、20、30mg/dL尿酸干预(0mg/dL为对照组),干预时间为24、48、72、96h。电镜观察肝细胞形态及结构。MTT法检测肝细胞活力。Annexin V-FITC/PI双染法,流式检测肝细胞凋亡。试剂盒检测肝细胞功能指标AST和ALT;DNA损伤指标8-OhdG;线粒体功能指标SDH、CCO和ATP;氧化应激指标MDA、GSH及SOD的水平。DCFH-DA标记,荧光显微镜拍照法检测ROS。Westen blot检测Nrf2-ARE信号通路下游SOD、GSH和γ-GCS蛋白水平;RT-PCR检测Nrf2-ARE信号通路下游SOD和GSH的mRNA水平。结果:1.肝细胞形态及凋亡:在尿酸为20mg/dL时肝细胞出现形状不规则、表面绒毛较少,出现凋亡及坏死细胞;在>20mg/dL,作用72~96h后肝细胞凋亡率大于对照组(P<0.05)。2.肝细胞功能及DNA损伤:ALT、AST在尿酸>20mg/dL,作用72~96h后高于对照组(P<0.05);8-OhdG随尿酸水平增加及作用时间延长呈升高趋势,30mg/dL尿酸组最高;3.肝细胞氧化应激指标:SOD、GSH在尿酸为20mg/dL,作用48~72h后较对照组降低(P<0.05);MDA、ROS在尿酸>20mg/dL,作用96h后较对照组均增大(P<0.05)。4.肝细胞Nrf2-ARE下游m RNA水平及蛋白的表达:SOD和GSH mRNA水平在尿酸>10mg/dL,作用48~72h后较对照组降低(P<0.05);SOD、GSH和γ-GCS蛋白在尿酸为30mg/dL,作用24、72h后较对照组降低(P<0.05);5.线粒体功能指标:ATP、SDH和CCO在尿酸>10mg/dL,作用24~72h后高于对照组(P<0.05)。结论:高水平尿酸(>20mg/dL)可诱导肝细胞形态改变,肝细胞活力及凋亡增加,并可能通过诱导氧化应激加剧对肝细胞及线粒体功能的损伤。