造血功能障碍是指由于疾病因素或物理因素引起骨髓造血组织明显减少,造血功能低下或者部分衰竭,使得血细胞生成障碍,从而引起造血功能障碍,是临床上常见的疾病后遗症,如肿瘤的化学治疗、放射治疗,骨髓移植,化学药物毒性损伤和一些自身免疫性疾病包括免疫功能紊乱、再生障碍性贫血等。目前,国内外对造血障碍类疾病的治疗方案十分有限,治疗费用极高,治疗效果并不理想。治疗造血功能障碍的重大难题也是关键的问题是如何重建患者体内造血和免疫功能。鸡血藤提取物是一种多组分提取物,相较单一的化学药而言,具有多靶点、低毒性的特点,但目前文献报道鸡血藤提取物的提取工艺多采用乙醇和乙酸乙酯等有机试剂直接提取,对有效成分的提取缺乏针对性,同时对鸡血藤中的水溶性成分提取效果较差,同时缺乏系统的研究阐述其免疫调节和促进造血的活性及相关机制。本文主要研究采用超临界二氧化碳萃取技术开发和优化鸡血藤提取物的提取工艺,并系统地对该提取物的免疫调节活性和促进造血活性进行评价和机制探讨。本研究主要包括以下几个方面:1.鸡血藤提取工艺的研究以黄酮类物质提取率为指标,采用超临界二氧化碳萃取技术提取鸡血藤中有效物质。首先通过单因素实验分别考察料液比、提取温度、压力和时间对总黄酮提取率的影响。在此基础上,通过正交试验优化个参数的范围,为以鸡血藤为原材料的中药生产提供可参考的工艺参数。单因素实验结果显示,黄酮类物质提取率在料液比范围为1:3¹:5 mg/mL,萃取温度范围为30⁵0℃,萃取时间范围为3⁵ h,分离釜二氧化碳压力范围为25⁴5 Mpa。根据单因素实验结果设计四因素三水平的正交试验表,实验结果显示,料液比、萃取温度、时间和压力等四个因素的极差大小排序为:温度>料液比>时间>压力,即四个因素的影响效果大小排序为温度>料液比>时间>压力。实验中黄酮萃取率最高的生产工艺为:料液比（g/mL）1:7,萃取温度为50℃,萃取时间为4 h,二氧化碳压力为25Mpa。通过验证实验证明,采用正交试验中最佳提取工艺可以保证提取物中总黄酮提取率达到1.7%以上,因此确定该工艺为鸡血藤提取的最佳工艺。2.鸡血藤提取物免疫调节活性及其机制的研究为了确定鸡血藤提取物在免疫调节方面的作用,本章采用氢化可的松（HC）建立小鼠免疫抑制模型,经过21天治疗,实验证明鸡血藤提取物可以提高免疫细胞的作用与活力并且促进免疫调节因子的释放,这一过程提高了血清中免疫球蛋白IgG,IgM水平,并且提高了免疫调节细胞因子IL-2,IL-6,IL-10,IL-12,IFN-ɑ与IFN-γ的水平。通过NK杀伤试验和淋巴细胞增殖以及迟发型变态反应实验,血清溶血素实验结果证明,鸡血藤提取物可以加强机体固有免疫系统、细胞免疫系统以及提升NK细胞功能。此外,氢化可的松引起小鼠淋巴内NFκB磷酸化水平显著增加,IκB磷酸化水平显著下降,而鸡血藤提取物能显著改变NFκB的异常表达,因此具有增强骨髓造血能力和提高免疫功能的作用3.鸡血藤提取物促进造血活性及其机制的研究为了开展鸡血藤提取物在促进造血方面的活性和研究其作用机制,本文采用⁶⁰Coγ射线辐照建立小鼠造血抑制模型,通过鸡血藤的治疗,由放射线引起的造血障碍现象得以缓解,CSE可以增加小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数并以时间依赖性增加小鼠外周血白细胞数量,说明CSE在⁶⁰Coγ射线诱导的小鼠模型中同样具有免疫调节能力。此外,集落形成实验证明了CSE可以促进小鼠骨髓中造血祖细胞的增殖和分化,该结果说明CSE可以提升红细胞、血小板等造血相关细胞的水平。CSE通过调节IL-3和GM-CSF的水平提升小鼠的造血能力。同时,⁶⁰Coγ射线引起小鼠脊髓内MEK和Erk磷酸化水平显著下降,而鸡血藤提取物能显著增加这两种蛋白的活化水平。根据上述结果得出结论,CSE可以通过MEK/Erk通路改善由⁶⁰Coγ射线造成的造血障碍,该活性是通过提升白细胞数量、调节促造血因子水平、增加机体免疫能力和骨髓造血祖细胞增殖和分化实现的。综上所述,采用超临界二氧化碳萃取技术得到的鸡血藤提取物可以调节机体免疫功能和造血功能,他是通过NFκB信号通路和MEK/Erk信号通路来实现这两种活性的。本文为鸡血藤提取物在造血障碍类疾病的治疗和肿瘤放化疗后的免疫调节剂中的应用提供药效学和药理学依据。