转扁桃AcCBF1基因对烟草生长发育及抗逆性的影响

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zjhzjhzjh111
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AcCBF1基因是扁桃的重要转录因子,为了解该基因在扁桃生长发育和抗逆反应中发挥的具体作用,试验通过农杆菌介导法获得转AcCBF1基因烟草,以转空载体烟草和野生烟草为对照,观测了转基因烟草的株高、叶片数量、节间长度、茎干粗度、现蕾时间等指标;夏季高温条件下转基因烟草光合及叶绿素荧光参数指标;低温胁迫下转基因烟草中AcCBFI基因的相对表达量、叶片和花药内源激素含量及转AcCBF1基因烟草花粉育性指标。以期为揭示扁桃抗逆机制提供一定的理论依据。主要结果如下:(1)通过农杆菌介导法获得24株抗性植株;经PCR鉴定筛选出3株转AcCBF1基因烟草。随后,通过植物组织培养技术获得400株转AcCBF1基因烟草。(2)转基因烟草较野生烟草的植株矮小、节间短、叶片数少、茎干粗壮、现蕾时间长,转空载体烟草与野生烟草的生长指标无明显变化。(3)经过连续一星期室外37℃高温后,转基因烟草的Pn、Gs高于野生烟草,Tr、Ci低于野生烟草,且转基因烟草Fo的上升幅度及Fm、Fv/Fm、Fv/Fo、ΦPSⅡ的下降幅度均小于野生烟草;转空载体烟草和野生烟草的光合参数和叶绿素荧光参数无显著差异。(4)低温胁迫前,转基因烟草叶片及花药中AcCBF1基因的相对表达量极低;而在4℃低温胁迫过程中,该基因的相对表达量快速上升,在6h时达到最高值,之后逐渐下降。(5)4℃低温肋迫下,转基因烟草叶片和同一花粉发育时期花药ABA、JA含量的上升幅度及GA、BR、IAA、ZT含量的下降幅度均小于野生烟草,而转空载体烟草和野生烟草的变化幅度几乎一致。此外,各株系烟草均表现出四分体时期的花药内源激素变化幅度最大,花粉母细胞时期的变化幅度最小。(6)在转基因烟草的不同花粉发育时期进行4℃低温处理后,花粉萌发率呈现下降趋势,其中在四分体时期进行低温处理后,花粉萌发率下降幅度最大,其次是单核时期,再者是双核成熟时期,最后是花粉母细胞时期;而花粉量只在四分体时期进行低温处理后下降幅度最大,其余时期低温处理后无显著变化。另外,转基因烟草的花粉萌发率和花粉量下降幅度显著低于野生烟草,而转空载体烟草的下降幅度与野生烟草的没有显著差异。
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