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猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2，PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属，是一种无囊膜包裹的单链环状DNA病毒，其是引起断奶仔猪衰竭综合征的主要病原。有研究表明，在PCV2感染猪肺泡巨噬细胞内，PCV2 Cap通过与宿主蛋白gC1 qR相互作用，激活PI3K/Akt和p38 MAPK信号通路，进而显著促进巨噬细胞中的白介素-10(interleukin-10，IL-10)生成。但是gC1qR在PCV2的体内复制及其导致的病理变化有何种作用？目前并不清楚。本试验拟通过构建靶向于猪gC1qR基因的CRISPR/Cas9重组慢病毒系统，将其感染仔猪后获得部分组织gC1qR基因敲除的仔猪，以PCV2感染部分组织gC1qR基因敲除的仔猪，复制PCV2感染猪模型，阐明gC1qR缺失对PCV2体内复制和诱导病理变化的影响。 研究取得以下实验结果: 1.本试验利用CRISPR/Cas9系统，设计了3个靶向于猪gC1qR基因的gRNA(g113、g229和g246)，分别成功构建了3个重组慢病毒rLenti-113、rLenti-229和rLenti-246，将构建好的慢病毒感染PK-15细胞后，嘌呤霉素筛选阳性克隆细胞，western blotting检测和测序鉴定，确定在rLenti-113感染的PK-15细胞中成功获得了一株gC1qR基因敲除的PK-15细胞系。 2.大量包装rLenti-113和rLenti-Blank后，以109 copies感染7日龄仔猪4周后，通过western blotting和免疫组织化学技术鉴定，成功获得了部分肺脏和肺门淋巴结中gC1qR缺失的仔猪，分别以PCV2感染正常仔猪、空白慢病毒感染仔猪和部分组织缺失gC1qR的仔猪，结果发现在正常仔猪和空白慢病毒感染仔猪中成功复制了PCV2感染模型，而在部分组织缺失gC1qR的仔猪中，肺脏和肺门淋巴结中PCV2感染诱导的病理变化减轻。 3.相同剂量的PCV2感染正常仔猪、空白对照仔猪和部分组织缺失gC1qR的仔猪，和空白对照仔猪相比，部分组织缺失gC1qR的仔猪在PCV2感染1周后血清中病毒的拷贝数较低，感染4周后肺门淋巴结中的病毒拷贝数较低，而肺和肝脏中病毒拷贝数的变化不明显;且在部分组织缺失gC1qR仔猪的肺门淋巴结组织中，Cap和Rep的表达降低。 综合以上结果，本研究分别设计了3个靶向于猪gC1qR基因的gRNA，并成功构建了相应的CRISPR/Cas9重组慢病毒，将其分别感染PK-15细胞后确定了rLenti-113能介导靶向gC1qR基因并敲除，将rLenti-113感染仔猪后于肺门淋巴结中敲除了gC1qR基因，以PCV2感染部分组织缺失gC1qR的仔猪，发现在缺失gC1qR的相应组织中PCV2的复制水平降低，导致的病理变化有所减轻，此研究初步明确了gC1qR基因在PCV2的复制和致病过程中的作用，为进一步揭示PCV2致病机制提供了理论依据。