【摘 要】
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由于细菌的耐药性,使得抗生素对治疗越来越多的细菌感染变得越来越无效。目前已经发现了多种广谱耐药细菌,再加上不良的卫生条件和不良的食品保存以及耐药菌的快速传播,使抗生素治疗更加复杂化。由于细菌在抗生素的使用下,在生存斗争中逐渐产生可以靶向分解长期使用的抗生素的分解酶,从而产生耐药性,这说明传统类型的抗生素已经不适用于杀菌和治疗细菌感染。本论文结合了银离子和天然的壳聚糖衍生物两者的优异性能并通过制备表
【基金项目】
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浙江省自然科学基金（LY20B040001）；
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由于细菌的耐药性,使得抗生素对治疗越来越多的细菌感染变得越来越无效。目前已经发现了多种广谱耐药细菌,再加上不良的卫生条件和不良的食品保存以及耐药菌的快速传播,使抗生素治疗更加复杂化。由于细菌在抗生素的使用下,在生存斗争中逐渐产生可以靶向分解长期使用的抗生素的分解酶,从而产生耐药性,这说明传统类型的抗生素已经不适用于杀菌和治疗细菌感染。本论文结合了银离子和天然的壳聚糖衍生物两者的优异性能并通过制备表征得到CageAg/SCS复合物。分别以DPPH自由基的清除能力、还原力、H2O2的清除能力为指标,评估了CageAg/SCS复合物的抗氧化性能;以大肠杆菌（E.coli O157:H7）和金黄色葡萄球菌（S.aureus ATCC6538）为供试菌,测定了CageAg/SCS复合物对供试菌的抑菌作用和生物被膜形成的抑制。主要研究结果如下:（1）以间苯二甲醛和三（2-乙基胺）氨为原料,经过两步反应得到氮杂穴醚配体,两步总产率为52.3%。再同硝酸银络合,得到CageAg,化合物结构经核磁和质谱进行了确定。以壳聚糖和1,3-丙磺酸内酯为原料经亲核取代反应得到SCS,并经红外和核磁进行了结构确定。（2）利用UV-Vis和ICP-MS测定了不同CageAg和SCS配比的复合物,UV-Vis结果显示银离子的存在,ICP-MS结果显示SCA1、SCA2、SCA3和CageAg中银离子浓度分别为0.007 mg/mg、0.004 mg/mg、0.003 mg/mg和0.125mg/mg。（3）研究了CageAg、SCA1、SCA2、SCA3和SCS的抗氧化活性。研究发现这5种样品均具有一定的抗氧化性。CageAg对DPPH自由基清除和还原力具有最大的抗氧化性能,当浓度为0.4 mg/m L时,DPPH在326 nm和517 nm处的自由基清除率高达42.24%和53.14%;还原力吸光值为1.85;几种化合物对于H2O2的清除作用主要集中在前40 min,240 min后SCA1具有最大的清除能力57.3%。随着SCS含量的增加SCA1、SCA2、SCA3和SCS的抗氧化能力（DPPH自由基、还原力和过氧化氢）逐渐减弱。（4）CageAg具有较强的抑菌能力,随着SCS含量的增加,复合物的抑菌活性略有降低。具体为:CageAg、SCA1、SCA2、SCA3和SCS对E.coli的MIC分别为0.031 mg/m L、0.12 mg/m L、0.12 mg/m L、0.25 mg/m L和0.62mg/m L,MBC值分别为0.12 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L、1.0 mg/m L和2.5 mg/m L;这5种样品对S.aureus的MIC依次为0.015 mg/m L、0.12 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L和0.62 mg/m L,MBC值依次为0.031 mg/m L、0.5mg/m L、1.0 mg/m L、2.0 mg/m L和5.0 mg/m L。（5）实验发现E.coli和S.aureus的生物被膜在培养2 d出现成熟期;CageAg/SCS复合物可以较好地抑制应试菌的黏附,抑制能力CageAg最强,在MIC浓度下CageAg的培养基对E.coli和S.aureus的黏附能力分别为3.90和4.16 log CFU/cm~2,随着SCS的含量增加而略有降低;激光共聚焦图片显示CageAg、SCA1、SCA2、SCA3和SCS均可以抑制两种供试菌生物被膜的形成,其中CageAg和SCA1显示较强的抑制生物被膜形成能力。
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