蒙古沙冬青AmCAT和AmZF基因的克隆与功能分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:esacjw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
前人研究表明,过氧化氢酶(Catalase,CAT)和锌指型转录因子(zincfingertranscriptionfactor,ZF)在植物响应和抵抗多种非生物逆境中起重要作用。本论文从强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthusmongolicus)中克隆到AmCAT和AmZF的cDNA,并对二者在高盐、低温和干旱胁迫下的表达进行了动态分析,然后将它们分别转入拟南芥进行了功能鉴定,主要研究结果如下:(1)用RT-PCR方法扩增到AmCAT的编码区cDNA,由1479bp组成,推测其编码蛋白含493个氨基酸残基,分子量为56.86KDa,等电点为7.25,可能为亲水性蛋白,定位在过氧化物酶体中。(2)AmCAT的表达受高盐、低温和干旱胁迫的显著诱导,尤其在干旱和盐胁迫下其表达量持续上调。(3)将AmCAT编码区cDNA片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301的35S启动子之后,利用农杆菌介导法转化拟南芥。通过对转基因株系在干旱、高盐和外源ABA等处理下进行表型鉴定,发现AmCAT在耐旱和耐盐性中起正调节作用,而对外源ABA敏感性起负调节作用。(4)用RT-PCR方法扩增到AmZF的编码区cDNA,由441bp组成,预测其编码蛋白含146个氨基酸残基,分子量为16.31KDa,等电点为9.14,可能为亲水性蛋白,主要定位在细胞质中。(5)AmZF的表达受干旱、低温和高盐胁迫的显著诱导,尤其在干旱、低温胁迫下其表达量持续上调。(6)将AmZF编码区cDNA片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301的35S启动子之后,利用农杆菌介导法转化拟南芥。在干旱、高盐和外源ABA等处理下对转基因株系进行表型鉴定,证明AmZF在耐旱和耐盐中起正调节作用,而对外源ABA不敏感。
其他文献
单分散聚合物微球作为一类具有特殊形态的高分子材料,在许多领域得到了大规模应用。与传统的单分散聚合物微球的制备方法相比,沉淀聚合无需加入任何助剂,所得产物纯净且后处理过程简单。微球通过自组装可形成二维或三维胶体有序组装体,其高度有序的结构赋予了材料许多特殊的物理化学性能。液滴模板法是近年来发展起来的一种微球自组装方法,因其实验过程灵活,且易于调节组装体的大小和形态,受到国内外学者的广泛关注。本文首先