猪细小病毒病是由猪细小病毒(porcine parvovirus，PPV)引起的在母猪特别是初产母猪中不孕、流产，死胎、木乃伊胎等繁殖障碍综合性疾病。该病在全球范围内广泛存在，间接或直接造成了养猪业重大的经济损失。近年来，研究发现PPV出现了很多新的变异株。其中，猪细小病毒2型(Porcine parvovirus，PPV2)是2001年在缅甸猪戊型肝炎(HEV)研究过程中新发现的细小病毒科的成员，与传统的猪细小病毒（猪细小病毒1型）亲缘性较远。迄今为止，只在缅甸和中国有相关报道。我们在进行浙江省爆发的猪高热病相关研究中，分离到了PPV2，针对该病毒进行了一系列的研究。为了加强对该病的疫情监测和血清流行病学调查，有必要研发出一种在特异性和敏感性均较高的血清学检测方法。　　 本研究利用大肠杆菌表达系统表达了PPV2 VP2蛋白，在本实验室孙宗英的基础上探索性复核了间接ELISA检测方法:将构建好的载体转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达，而后通过提取包涵体，His亲和层析法纯化，透析法复性。将该重组蛋白作为抗原包被酶标板，以PCR阳性混合血清作为阳性血清及某猪场未吃初乳的新生仔猪阴性血清作为一抗血清，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG作为二抗，建立了针对PPV2 VP2抗体的间接ELISA。在方法复核过程中，对该间接ELISA各种反应条件进行调整，确定了最适工作条件。最后，重复性试验（批内，批间），敏感性试验结果表明，该方法是可靠的。同时利用本实验室徐雅萍建立的PPV2-ORF2重组腺病毒，对PPV2ORF2进行了真核表达，建立了针对PPV2ORF2间接免疫荧光检测方法。在试验过程中，对IFA使用的细胞系，接毒时间，固定液及固定时间，一抗反应浓度及反应时间，二抗FITC反应浓度及反应时间进行了摸索，最后对建立好的方法的特异性，敏感性及重复性进行了测定。实验结果证明，该检测方法可靠。　　 使用建立好的间接ELISA和间接免疫荧光方法对采集自华东地区的357份猪血清进行检测，结果发现间接ELISA方法检测得到138份阳性血清，间接免疫荧光检测得到130份阳性血清，在12个不同猪场血清中除部分血清外，其阳性复合率较好。两种方法对辅助监测PPV2抗体水平以及掌握流行病学规律有着较大意义。