LncNEN885抑制神经内分泌肿瘤细胞BON-1的上皮间质转化及迁移、侵袭

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:donny9707
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目的:研究 lncNEN885(lncRNA Enst00000414885)对 BON-1 细胞的上皮间质转化及BON-1细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,从而探究lncNEN885在胃肠胰神经内分泌肿瘤中发挥的作用。方法:通过临床3对胃神经内分泌肿瘤病人肿瘤组织和瘤旁正常组织的高通量RNA测序筛选出差异较大且表达较高的lncNEN885,通过qRT-PCR方法验证其在肿瘤组织中表达情况。然后通过转染过表达质粒和siRNA来改变lncNEN885的表达,用EdU法检测其对BON-1细胞增殖的影响,用transwell小室迁移和侵袭实验来观察lncNEN885对BON-1细胞迁移和侵袭的影响,用划痕实验来观察其对BON-1细胞运动能力的影响以及流式细胞分析方法分析lncNEN885对BON-1细胞凋亡的影响。另外,干扰和过表达lncNEN885后用Western blot检测 E-cadherin,vimentin 和 snail 蛋白水平的变化,了解 lncNEN885 在 BON-1 细胞的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中发挥的作用。结果:高通量测序结果显示在3对胃NENs组织标本中,与瘤旁正常组织相比,lncNEN885在肿瘤组织中表达降低,qRT-PCR显示了同样的结果。过表达lncNEN885抑制了 BON-1细胞的迁移和侵袭,对细胞增殖影响没有显著性差异,而干扰lncNEN885促进了 BON-1细胞的迁移和侵袭,同样对细胞增殖的影响没有显著性差异。另外,过表达lncNEN885导致上皮指标E-cadherin表达上调,间质指标vimentin和snail表达下调,干扰lncNEN885则得到相反的结果。而流式细胞分析显示过表达和干扰lncNEN885对BON-1细胞凋亡的影响没有显著性差异。结论:LncNEN885在胃NENs肿瘤组织中表达下调,通过调控E-cadherin,vimentin和snail的表达影响BON-1细胞的上皮间质转化,进而可能对BON-1细胞的迁移和侵袭产生影响,从而在胃NENs的转移中发挥重要的作用。
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