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目的1观察芙蓉膏粉剂溶液对金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌生长是否具有抑制作用。2首先用金黄色葡萄球菌感染家兔建立浅表软组织感染家兔动物模型,然后再分别外涂高剂量芙蓉膏、低剂量芙蓉膏,最后观察家兔大体生长情况、光学显微镜下观察浅表软组织感染家兔动物模型用药前后组织病理改变;检测全血白细胞及中性粒细胞数量;检测血清超敏-C反应蛋白、肿瘤坏死因子-a、白介素-6、血清总补体活性及转化生长因子-β1表达水平。揭示芙蓉膏对家兔浅表软组织感染的治疗作用及机制,为其临床应用提供理论依据。方法1体外抑菌实验1.1分组方法:浓度为0.3g/ml芙蓉膏粉剂溶液为实验组,选择复方黄柏涂剂及青霉素作为对照组。1.2干预方法:采用纸片琼脂扩散法,利用三种药物对金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌菌株的生长进行抑菌实验。1.3观察指标及检测方法:肉眼观察三种药物对金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌菌株生长是否具有抑制作用,如有抑制作用,用毫米刻度尺测量各组抑菌环并记录。2体内实验2.1分组方法50只新西兰家兔按体质量由低到高编号,然后用随机数字表法将其分为5组,每组10只,分别为空白组、模型组、百多邦组、芙蓉膏高剂量组、芙蓉膏低剂量组。2.2造模家兔背部皮下注射金葡菌0.5ml(1.5×108CFU/ml),12小时后见家兔背部红肿热痛为造模成功。2.3干预方法空白组:生理盐水外涂脱毛处,1次/天,每次涂擦约5ml;模型组:生理盐水外涂擦病损处,1次/天,每次涂擦约5ml;百多邦组:模型组,给予百多邦外涂,厚度5mm,1次/天;芙蓉膏高剂量组:模型组,给予芙蓉膏外涂厚度5mm,1次/天;芙蓉膏低剂量组:模型组,给予芙蓉膏外涂厚度3mm,1次/天。2.4观察指标及检测方法2.4.1大体生长情况:肉眼观察各组家兔每天用药后病变组织修复情况、进食情况、身毛光泽度、四肢活动及精神状态,用电子秤测量各组家兔用药7天后的体质量。2.4.2病理组织学变化:采用光学显微镜观察浅表软组织感染家兔动物模型用药前后组织病理改变。2.4.3炎症反应:(1)血常规:白细胞及中性粒细胞数量采用血细胞分析仪检测;(2)炎症因子:hs-CRP、TNF-a及IL-6采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbentassy ELISA);2.4.4免疫功能:CH50亦采用ELISA;2.4.5组织愈合:TGF-β1采用ELISA。2.5运用的统计学方法所有数据均采用SPSS17.0版本统计软件包处理,P﹤0.05认为差异有统计学意义。计量资料采用均数±标准差(sx±)表示,各组家兔给药7天后所测体重采用成组设计资料方差分析;三个时间点所测的白细胞数量、中性粒细胞数量、hs-CRP、TNF-a、IL-6、CH50及TGF-β1含量比较采用重复测量设计资料的方差分析进行分析。结果1芙蓉膏体外抑菌实验结果:芙蓉膏粉剂溶液对金黄色葡萄球菌的抑菌环为2.5mm;对大肠埃希菌无明显抑制作用;复方黄柏涂剂对金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌均无明显抑制作用;青霉素纸片对金黄色葡萄球菌的抑菌环为6mm,对大肠埃希菌无明显抑制作用。2体内实验结果:2.1大体生长情况:(1)实验过程中正常组无死亡,体重正常增长,背部脱毛区皮肤无改变,进食正常,身毛密集有光泽,精神状况良好、四肢活动轻快;实验过程中模型组家兔无死亡,体重无明显增长,背部感染区红肿仍明显,修复缓慢,进食少,皮毛干枯、蓬松、凌乱易脱落,毛色欠光泽,精神萎靡,四肢活动缓慢;百多邦组、芙蓉膏高剂量组、芙蓉膏低剂量组家兔上述症状相对模型组减轻,但不能达到正常对照组水平。(2)与正常组相比模型组体重明显降低,P<0.01,说明两组具有差异性;与模型组相比百多邦组、高剂量芙蓉膏组和低剂量芙蓉膏组家兔的大体生长情况均明显改善,三组家兔体质量均显著升高(均P﹤0.01)。2.2病理组织学变化:与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔背部病变组织病理变化明显,脓肿明显缩小,炎性细胞浸润明显减轻,纤维组织增生,差异显著;与低剂量组相比高剂量组脓肿缩小,炎性细胞浸润减轻,成纤维细胞增多,纤维组织增生,具有差异性。2.3血常规变化:与正常组相比模型组家兔全血中白细胞和中性粒细胞三个时间点均高于正常组,P<0.01,具有统计学意义;与模型组相比百多邦组、高剂量芙蓉膏组和低剂量芙蓉膏组家兔全血中白细胞及中性粒细胞三个时间点均明显降低(均P﹤0.01)。与百多邦组相比高剂量组全血中白细胞稍降低,但P为0.333,无统计学意义;与低剂量组相比高剂量组全血中白细胞稍降低,P<0.01,具有统计学意义;与百多邦组相比高剂量组三个时间点全血中性粒细胞稍降低,P<0.01,具有统计学意义;与高剂量组相比低剂量组三个时间点全血中性粒细胞偏高,P<0.05,具有统计学意义。2.4炎症因子变化:(1)与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔血清中hs-CRP三个时间点均有不同程度下降,依次P<0.01;P<0.01;P=0.072,故低剂量组虽有所下降,但无统计学意义;与百多邦组相比高剂量组血清中hs-CRP三个时间点稍下降,但P为0.985,无统计学意义;与高剂量组相比低剂量组血清中hs-CRP三个时间点稍升高,但只有均值的差异,P为0.140,无统计学意义。(2)与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔血清中TNF-a三个时间点均有不同程度下降,依次P<0.01;P<0.01;P<0.05,说明三组均具有统计学意义;与百多邦组相比高剂量组三个时间点血清TNF-a水平有不同程度下降,P<0.05,具有统计学意义;与高剂量组相比低剂量组三个时间点血清TNF-a水平有不同程度升高,P<0.01,具有统计学意义。(3)与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔血清中IL-6三个时间点均明显降低(均P<0.01);与百多邦组相比高剂量组三个时间点血清IL-6水平稍降低,但P为0.230,无统计学意义;与高剂量组相比低剂量组三个时间点血清IL-6水平明显升高,P<0.01,具有统计学意义。2.5 CH50变化:与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔血清中CH50三个时间点均有不同程度升高,三组比较均具有统计学意义(均P<0.01);与百多邦组相比高剂量组家兔血清CH50三个时间点均稍升高,但P为0.876,无统计学意义;与高剂量组相比低剂量组三个时间点血清CH50均明显降低,P<0.05,具有统计学意义。2.6 TGF-β1变化:与模型组相比百多邦组、高剂量组及低剂量组家兔血清中TGF-β1三个时间点均有不同程度增加,但只有模型组与高剂量组具有统计学意义(依次P为0.090;P<0.05;P为0.259);与百多邦组相比高剂量组家兔三个时间点血清TGF-β1均升高,但只有均值的差异,P为0.522,无统计学意义;与高剂量组相比低剂量组家兔三个时间点血清TGF-β1均降低,P为0.145,无统计学意义。结论1芙蓉膏粉剂溶液对金黄色葡萄球菌生长有抑制作用。2芙蓉膏可调节模型家兔WBC、NE、hs-CRP、TNF-a及IL-6水平,具有一定抗炎作用。3芙蓉膏可调节模型家兔血清CH50表达水平,具有一定增强免疫功能作用。4芙蓉膏可调节模型家兔血清TGF-β1的表达水平,具有一定加速病变组织修复的作用。