糖分利用能力提高的酿酒酵母突变体的选育

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以高产乙醇的工业酿酒酵母菌株MF1002为始发菌株,对菌株MF1002的营养细胞进行紫外诱变,筛选出两株性状稳定的呼吸缺陷型突变体MF15c和MF11a。根据菌体细胞对TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)显色测定呼吸强度的结果表明,两株突变体菌株的相对呼吸强度分别只有始发菌株的57.77%和47.25%。与已有报道的呼吸缺陷突变体有所不同,这两株突变体菌株的细胞生长速率只在培养初期稍低于始发菌株,总体生长速率和始发菌株几乎无差异,在YPD平板上培养也不形成小菌落。蔗糖发酵试验的结果比较表明,两株突变菌株的乙醇产量与始发菌株相比分别提高了6.48~6.59%(MF15c)和1.66~1.97%(MF11a),而发酵终止时的残总糖含量较始发菌株分别显著降低了34.85%和19.70%,发酵率明显高于始发菌株,分别提高6.69%和4.71%,表明这两株突变菌株是新型的呼吸缺陷型突变体。由于糖分利用能力的提高和乙醇发酵效率的提高可显著降低生产成本,因此我们认为这两株突变体菌株均有较高的潜在工业利用价值。   对MF15c和MF11a两突变菌株的甘蔗糖蜜酒精发酵特性进行研究。研究结果表明,突变菌株MF11a和MF15c利用甘蔗糖蜜培养基发酵,其乙醇产量较始发菌株MF1002有所提高;突变体MF15c和MF11a利用生产的补料工艺对甘蔗糖蜜进行发酵,发酵终止时发酵液中的残总糖含量比始发菌株分别降低了10.14%和16.82%。我们认为两突变菌株具有用于甘蔗糖蜜酒精发酵生产的潜在价值。   此外,对菌株乙醇耐受性进行了测定;并对糖酵解、三羧酸循环和其他关键代谢途径中的关键酶的进行酶学研究,为进一步鉴定酿酒酵母高糖分利用性能的机理研究提供参考。
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