【摘 要】
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目的:探讨人非小细胞肺癌及其相应癌旁组织中WT1基因(Wilms’tumor gene1,WT1)的表达,体外研究其与肺癌细胞增殖的关系。方法:应用免疫组织化学及实时荧光定量PCR法检测79例
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目的:探讨人非小细胞肺癌及其相应癌旁组织中WT1基因(Wilms’tumor gene1,WT1)的表达,体外研究其与肺癌细胞增殖的关系。方法:应用免疫组织化学及实时荧光定量PCR法检测79例非小细胞肺癌组织及其相应癌旁组织中WT1的表达情况。构建重组质粒pLV-GFP-WT1和p LL3.7-WT1-shRNA,并通过慢病毒包装技术感染非小细胞肺癌细胞系(A549/H1299/H1650),应用蛋白质印迹法检测NSCLC细胞中WT1及Cyclin D1蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖,裸鼠成瘤实验检测在体内WT1对NSCLC增殖的影响,细胞流式仪检测NSCLC细胞周期。结果:非小细胞肺癌组织中WT1的表达水平高于相应的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。重组质粒成功构建,慢病毒包装后,感染NSCLC细胞,Western-blot验证感染成功;在体外和体内,高表达WT1能显著促进NSCLC的增殖,降低WT1的表达效果则相反;WT1通过上调Cyclin D1的表达促进NSCLC细胞从G1期向S期转化。结论:WT1在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于相应癌旁组织,WT1通过上调非小细胞肺癌细胞内的Cyclin D1的表达促进非小细胞肺癌细胞的增殖,提示WT1在非小细胞肺癌中扮演癌基因的角色。
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