土槿乙酸对人肝癌细胞中VEGF和HIF-1α表达的影响

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目的观察土槿乙酸(pseudolaric acid B,PAB)对人肝癌细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)-1α表达的影响。方法以0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L的土槿乙酸处理人肝癌细胞,培养6h;对照组为0μmol/L,实验组为0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L;采用CCK-8法分析细胞增殖;RT-PCR方法检测人肝癌细胞中VEGF、HIF-1α的mRNA表达;Western Blot方法检测人肝癌细胞中VEGF、HIF-1α的蛋白表达。结果(1)不同浓度的土槿乙酸作用于人肝癌细胞,细胞增殖率与对照组相比差异有统计学意义,(P<0.05)。(2)对VEGF的影响:随着PAB浓度的逐渐增加,VEGF mRNA表达逐渐降低,与对照组(2.53±0.07)相比分别降低至1.90±0.02、1.31±0.03、0.86±0.04、0.60±0.03、0.34±0.02,差异有统计学意义(P<0.01);VEGF蛋白表达逐渐降低,与对照组(3.06±0.15)相比分别降低至2.60±0.09、2.42±0.07、1.85±0.05、0.92±0.05、0.60±0.04,差异有统计学意义(P<0.01)(3)对HIF-1α的影响:随着PAB浓度的逐渐增加,HIF-1αmRNA表达分别为1.92±0.04、1.89±0.01、1.92±0.03、1.89±0.01、1.91±0.02,与对照组(1.91±0.06)相比,差异无统计学意义,(P>0.05);HIF-1α蛋白表达逐渐降低,与对照组(1.80±0.02)相比分别降低至1.74±0.02、1.69±0.01、1.63±0.02、1.59±0.01、1.55±0.01,差异有统计学意义(P<0.01)结论土槿乙酸抑制人肝癌细胞中VEGF mRNA和蛋白,HIF-1α蛋白的表达。土槿乙酸可能通过转录后机制抑制人肝癌细胞中HIF-1α的表达。
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