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在叶绿素合成途径中镁螯合酶和镁原卟啉甲基转移酶起着重要的作用,镁螯合酶I亚基会受到硫氧还蛋白的调节,D亚基能参与叶绿体到细胞核的反向信号传导,H亚基是ABA受体,GUN4(genomesuncoupled4)与H亚基相结合并能通过激活镁螯合酶的活性来促进叶绿素的合成,镁原卟啉甲酯在叶绿体和细胞核的相互调节中有重要的作用。所以研究叶绿素镁螯合酶及镁原卟啉甲基转移酶的结构对于进一步研究光合作用有着重要作用,本实验主要研究镁螯合酶三个亚基和镁原卟啉甲基转移酶在大肠杆菌中的表达性质,并纯化了部分蛋白用于蛋白结构的研究,构建共表达系统来验证浑球红细菌的镁螯合酶和镁原卟啉甲基转移酶在大肠杆菌体内的生物合成。
研究内容如下:
1.叶绿素合成途径中编码镁离子螯合酶及镁原卟啉甲基转移酶的基因的克隆及序列分析。
2.构建BchM、BchI、BchD、BchH的表达载体和共表达载体。
3.BchM、BchI、BchD、BchH蛋白的表达分析。
4.重组蛋白BchM的纯化。
5.BchH的C端结构域的表达和纯化。