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背景和目的：Survivin基因和XIAP基因是凋亡抑制因子家族的主要成员，它们在人类多种恶性肿瘤，包括卵巢上皮细胞癌中高表达，起着抑制细胞凋亡的作用，并且肿瘤细胞的化疗耐药性与IAP的高表达有直接的关系。IAP的高表达，导致化疗药物介导的细胞凋亡在效应阶段受到抑制，表达下调可促进肿瘤细胞凋亡和增加肿瘤对化疗药物的敏感性。本实验运用RNA干扰技术双向沉默卵巢癌耐药细胞株A2780-cp的Survivin基因和XIAP基因后，观察细胞的凋亡及顺铂对其敏感性的影响，为肿瘤的分子治疗奠定实验基础。
方法：（1）设计针对Survivin和XIAP的siRNA，体外化学合成。（2）用DMEM培养基卵巢癌A2780-cp细胞培养。（3）实验分组：空白对照组，脂质体转染组，单转Survivin-siRNA，单转XIAP-siRNA，双转Survivin-siRNA与XIAP-siRNA组，48小时后收集各组细胞。（4）WesternBlot检测各组细胞Survivin和XIAP蛋白表达情况。（5）通过PI染色、AnnexinV-FITC流式细胞术观察细胞凋亡情况。（6）MTT法检测转染后及顺铂对细胞增殖的影响。
结果：（1）Westernblot结果，共转染siRNA组Survivin和XIAP的蛋白抑制率分别为71.11％、76.81％；单转Survivin-siRNA组的Survivin蛋白抑制率为75.00％，XIAP的蛋白表达与对照组及脂质体组比较无明显下降，而单转XIAP-siRNA组的XIAP蛋白抑制率高达82.48％，Survivin蛋白表达与对照组及脂质体组比较无明显下降。（2）PI染色结果显示细胞调亡形态学变化，转染组细胞减少，可见细胞核固缩、核碎片、发泡、体积变小及凋亡小体形成，共转染组比单转组结果更明显。（3）流式细胞仪检测细胞早期凋亡率结果显示：空白对照组，脂质体转染组、单转Survivin-siRNA组、单转XIAP-siRNA组、双转染组的凋亡率分别为1.18％、3.19％、12.82％、11.18％、26.98％；共转染组凋亡率高于两个单转组及脂质体组（P<0.05），单转Survivin-siRNA及单转XIAP-siRNA组之间无差异（P>0.05），空白对照组及脂质体组之间无明显差异（P>0.05）。（4）MTT检测顺铂对细胞增殖的影响，结果显示在同一药物浓度下，共转染Survivin-siRNA和XIAP-siRNA后，细胞增值率下降明显，与两个单转染组及脂质体转染组比较有统计学差异（p<0.05），顺铂在细胞增值率为50％时的抑制浓度（IC50）值为（0.10±0.01）μg/mL，单转Survivin-siRNA组的IC50值为（0.61±0.02）μg/mL，单转XIAP-siRNA组的IC50值为（0.62±0.01）μg/mL，而空白对照、脂质体组IC50值分别为（11.08±0.01）μg/mL、（9.82±0.02）μg/mL，共转染组的细胞IC50明显低于各组细胞（p<0.05），两个单转染组之间没有明显差异（p>0.05）。
结论：本试验中，SiRNA靶向于两个凋亡抑制蛋白，能有效降低蛋白表达，阻断凋亡抑制通路，更有效地促进卵巢癌细胞耐药株A2780-cp凋亡，提高肿瘤细胞对化疗的敏感性，促进其凋亡，为临床对耐药的卵巢肿瘤治疗提供实验依据。