唐氏综合征(Down Syndrome，Ds，又称先天愚型或21三体综合征)是—种最常见的先天性染色体数目畸形，发病率高达0.12％。目前该病的诊断是通过羊水穿刺、绒毛膜活检或脐静脉穿刺术获取胎儿细胞，经培养后进行染色体核型分析。它存在以下缺点：1、羊水细胞培养难度大，周期长(2周多)，不易得到普及而影响产前诊断的开展。2、羊水穿刺等技术是有创性检查，可导致1％的胎儿流产率，故不易被孕妇所接受而漏诊。由于上述原因的影响，我国每年约有25000个DS患儿出生，给家庭和社会带来严重经济负担，并降低国民的人口素质。故迫切需要一种对孕妇无创伤，对胎儿无风险，且能准确快速简便地进行DS诊断的新方法。 短串联重复序列(STR)广泛分布人类基因组中，具有操作简便，分型准确和丰富的多态信息量等特点而成为第二代DNA分析技术的核心。STR位点基因型在正常二倍体胎儿中常表现为1：1的二条带图谱，而三体的胎儿常表现为1：1：1三体图谱或2：1双倍剂量图谱，3条带图谱是诊断三体的金标准，双倍剂量图谱为辅助诊断指标。故在21号染色体上DS关键区内选择10个STR位点(D21S11、D21S1432、D21S1413、D21S1414、D21S1446、D21S1437、D21S2039、D21S1270、D21S141 1、D21S1412)，根据STR基因型的表现，可进行DS的基因诊断。由于不同民族具有不同的基因库，在应用STR位点进行基因诊断时，首先必须阐明该民族的STR结构分布特征。故在北京地区汉族人群中随机抽取200多例外周血对其中未知结构特征的9个STR位点进行PCR-STR分型。根据基因序列，设计1对引物，进行PCR反应，其产物经聚丙烯凝胶电泳和银染后与等位基因标准混合物对比，或运用基因片段扫描技术，确定各个样本的基因型，最后进行统计学处理。结果首次阐明了中国汉族人群该9个STR位点的结构分布符合Hardy-weinberg定律，具有较高的杂合度和丰富的多态信息量，证实为21号染色体的良好的遗传标记，为基因诊断、亲子鉴定等DNA分析技术提供理论和概率计算依据。 联合运用~匕违10个STR位点对23例可疑患者和26例DS筛查出高危孕妇的羊水细胞进行DS的基因诊断。将10个STR位点的陀R产物用聚丙烯铣胺凝胶电泳和银染法或基因片段扫描法幽神卸叮，结果从23例可疑患者中发现7例璐患者，其中6例均出现三条带图谱，1例虽未发现3条带图谱，但除纯合子外其余位点均表现为双倍剂量(2:1)的2条带图谱。26例胎少公准水细胞盯R基因型均表现为正常2条带图谱 (1:1)，表明为非璐胎儿。将基因诊断结果与染色体核型分析结果对比，二者完全一致‘但基因诊断仅需耗时2~3天，操作简便，适宜推广应用。以上结果表明联合应用10个STR位点司稚确、快速简便地进行璐产前基因诊断。国内少数单位曾仅根据l~2个STR位点的基因型进行基因诊断声聪汰大。国外近几年来采用荧光陀R对1~4个STR位点基因型幽予分析，根据3条带或2:1的2条带图谱进往基因诊断。为此，本文在国内首次建立了联合应用10个SIR位点的荧光陀R，几乎使所有的DS患者出现3条带型而得到明确诊断。 近年来发现孕妇夕调血中存在微壕幼台少嘟胞，本文通过密度梯度离心获取有核血细胸舌，应用磁激活细胞分选法富集纯化夕调血中的有核红细胞，Kl eihauer染色鉴定出胎少断育核红细胞(刚砒犯)，应用显微切害g技才彬瞰单个胎儿有核红细胞，进行单细胞靶基因的预扩增和巢式咒R，最后应用基因片段扫描技术进行检测。靶基因的筛选是应用唐氏综合症基因诊断中的10个位点，通过卜眺绷台少以姆涂基因型完全不同或部分不同的盯R位点确定的，例如有3个，这样对刚班犯进行分析时就只作这3个STR位点的分析，同时也可进一步断定有核红细胞的来源。应用上述方法对20例DS筛查阳性的孕妇夕调血的胎少嘟胞幽于DS基因诊断，结果均成功分离出脚七有核红细胞，12例单细胞陀R成功扩增出靶基因片段，结果为非21三体胎儿。其结果与临床细胞遗传学检查一致，初步表明运用此策略可成功训称陇d性产前DS的基因诊断。无创性产前DS的单细胞基因诊断国内外未仄甘团道，偶见国夕游7一O个胎儿有核幻细胞混合在洲起进行天沧d性产前DS基因诊断，但有母喇翻台少断育核乡闯胞污染的可能。本研究策略在国内外尚属首见，有待于进一步深入研究。 孕妇外周血中除胎少图胞外，其血浆中还存在微量游离的胎儿侧A，是天沧!胜产前基因诊断的另一重要材料来源。对73例孕妇夕调血浆通过柱分离提取血桨总侧A后，应用巢式代R进布到治儿性别决定基因(SRY)的扩增，其灵敏度为97.36%，特异性85.71%，总符合率91 .7少y0(6认勺3)。表明应用孕妇夕调血游翻台儿洲A可进布孙咙d性产前性别鉴定，有助于性连锁遗传病高危胎儿的早期性拐lJ诊断。 总之，本辛首次阐明了21号染色体上9个弧位点在中国汉族人群中的杂合频率和多态信息含量，并建立了准确、快速、简便的璐产前基因诊断方注拜口无创性产前性别基因诊断方法，可及时进行DS的产前诊断和性别鉴定，从而有效预防DS和性连锁遗传病的患儿出生，具有明显的经济效益和社会效益。本文采用新策略初步对DS进行无创性产前基因诊