日粮营养水平对山羊瘤胃、瓣胃上皮NHE mRNA表达的影响

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenquanchenwen
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为了探讨山羊瓣胃上皮是否表达NHE mRNA及日粮营养对其表达的影响,本试验利用Genebank中牛的同种亚型NHE1、NHE3 mRNA序列分别设计引物(NHE1、NHE3),利用RT-PCR试验方法检测NHE1、NHE3 mRNA在山羊瓣胃上皮的存在;并进一步分析不同日粮营养水平、日粮因子半胱胺盐酸盐对山羊瘤胃、瓣胃上皮NHE mRNA表达的影响,为NHE在反刍动物上的研究提供基础资料。1 NHE1、NHE3 mRNA在山羊瓣胃上皮的表达采取山羊瓣胃(瓣页)组织样品,利用GeneBank中牛NHE3 mRNA(AJ131764.1)和NHE1 mRNA(U49432)的序列,分别设计出NHE3和NHE1引物序列,通过RT-PCR的方法,首次检测到NHE1、NHE3 mRNA在山羊瓣胃上皮组织中表达。NHE1、NHE3序列片段测定显示其与牛同种亚型之间的同源性分别达到91%、95%。2不同日粮营养水平对山羊瘤胃、瓣胃上皮NHE1、NHE3 mRNA表达影响的体内研究将8头断奶山羊随机分为试验和对照两组,在日粮中添加100g/d和0g/d精料,试验期为42天。RT-PCR结果显示,提高日粮营养对瘤胃、瓣胃上皮NHE1、NHE3 mRNA表达有一定促进作用(0.05<P<0.1)。3 IGF-I、丁酸对山羊瘤胃上皮NHE3 mRNA表达影响的体外研究采集山羊瘤胃后腹盲囊(caudal blind sac)靠近后沟处组织,分离上皮,经过IGF-I(25ng/mL)、丁酸钠(5mmol/L)处理24h,收集组织样。RT-PCR结果显示,IGF-I、丁酸显著促进瘤胃上皮NHE3 mRNA表达(P<0.05)。4日粮因子半胱胺盐酸盐对瘤胃、瓣胃上皮NHE3 mRNA表达影响的体内研究将8头2~3月龄断奶山羊随机分为试验和对照两组,在日粮中分别添加45mg/kg.BW.d和0 mg/kg.BW.d半胱胺盐酸盐(CT2000),试验期为35天。RT-PCR结果显示,CT2000显著促进瘤胃、瓣胃上皮NHE3 mRNA的表达(P<0.05)。综上所述,山羊瓣胃上皮存在NHE1 mRNA、NHE3 mRNA。动物饲养试验显示增加日粮营养对山羊瘤胃、瓣胃上皮NHE1、NHE3 mRNA的表达有一定的促进作用;体外试验进一步表明IGF-I、丁酸钠处理可以直接上调瘤胃上皮NHE mRNA表达;口服CT2000亦上调山羊瘤胃上皮NHE mRNA表达。
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