溴氰菊酯对罗非鱼的安全性评价

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溴氰菊酯是一种Ⅱ型拟除虫菊酯杀虫剂,随着近年来在农业生产上广泛应用,在环境中的污染日趋严重。本论文以罗非鱼为试验动物,应用分子生物学、细胞生物学等技术手段,研究了溴氰菊酯对罗非鱼的急性毒性、在罗非鱼体内的蓄积释放规律、对罗非鱼的免疫系统、抗氧化防御体系以及遗传效应的影响,从整体生物、组织细胞水平和分子水平多层次地评价了溴氰菊酯对罗非鱼的安全性。研究结果表明,溴氰菊酯对平均体长为13.0±1.0cm,平均体重为70.0±5.0g的罗非鱼96hLC50值为23.7/μg/L,根据农药毒性分级标准,溴氰菊酯对罗非鱼属高毒类农药。根据急性毒性试验结果,选择1/2 96hLC50以下浓度为试验浓度系列,即1μg/L,2μg/L,3μg/L,5μg/L和10μg/L对罗非鱼进行连续暴露染毒,分析溴氰菊酯的低剂量连续暴露对罗非鱼的生理生化和遗传指标的影响,结果如下:1)溴氰菊酯经15-20d可在罗非鱼体内达到蓄积平衡,肌肉和肝脏组织中的最大富集系数分别为1.85和2.20,肌肉组织的蓄积能力小于肝脏组织。在溴氰菊酯的释放过程中,肌肉组织的释放半衰期为21.62d,肝脏的释放半衰期为28.79d。2)经溴氰菊酯25d连续暴露后罗非鱼肝脏发生了明显的病变,但脏器系数未有显著的变化;而罗非鱼的脾脏无论是解剖形态,还是脏器系数与对照组相比均无明显差异。溴氰菊酯对罗非鱼溶菌酶的影响表现为低浓度组(2μg/L-5μg/L)溶茵酶呈现先升高后降低的趋势,而高浓度组(10μg/L)则相反,为先降低后升高。但随着暴露时间的延长,各试验组在20d时恢复至正常水平,血清中溶菌酶的含量与对照组相比无明显差异,至试验结束时(第25d)各浓度组溶菌酶的含量稳定,趋于一致。3)试验水温在23-27℃之间波动未对罗非鱼血清中乙酰胆碱酯酶的活性测定产生影响。在暴露染毒期间除1.0μg/L浓度组AChE活性与对照组相比抑制百分率未超过15%以外,其余各试验浓度组在不同时间内对罗非鱼AChE活性抑制百分率都超过30%,最高的抑制百分率达62.3%,表明2.0μg/L以上的试验浓度对罗非鱼AChE抑制作用明显。4)罗非鱼在1.0μg/L溴氰菊酯连续暴露25d后,其肌肉和肝脏中的GSH含量和GST、CAT、MAO的酶活性与对照组相比均未发生显著的差异(P>0.05),而2.0μg/L以上浓度的溴氰菊酯连续暴露对罗非鱼肌肉和肝脏中的GSH含量和GST、CAT、MAO的酶活性均产生了一定程度的影响:(a)溴氰菊酯连续暴露下罗非鱼肌肉和肝脏中的GSH含量和GST活性的变化规律为先升高后降低,且肝脏中的变化要大于肌肉中变化。在试验结束时,除1.0μg/L试验组外,其余试验组GSH含量和对照组相比均存在一定的差异;而2.0μg/L及以上试验组GST活性在试验结束时与对照组相比差异显著(P<0.01),低至对照组的7.6%—53.9%。(b)CAT活性的变化规律为先降低后升高,肝脏中的变化幅度要大于肌肉,在试验结束时除1.0μg/L试验组外,其余试验组CAT活性与对照组相比均有一定的变化。肌肉中的CAT活性与对照组相比最大降幅可达17.4%,肝脏组织CAT最大降幅可达59.9%-72.9%(P<0.01)。(c)MAO的变化规律为先升高后降低再恢复,在试验结束时除1.0μg/L试验组外,其余试验组MAO活性与对照组相比均有一定的变化。5)3.0μg/L以上浓度的溴氰菊酯连续暴露3d后对罗非鱼DNA产生了影响,引物S326能检出溴氰菊酯引起的罗非鱼基因组DNA发生的变化。3.0μg/L以上的溴氰菊酯连续暴露可显著提高罗非鱼外周嗜多染红细胞微核率,微核的发生率随暴露浓度的升高和暴露时间的延长具有明显的浓度—效应和时间—效应关系。研究结果显示,2.0μg/L以上浓度的溴氰菊酯可对罗非鱼的生理机能产生一定的影响,这种影响在一定程度上关系到罗非鱼的养殖品质。因此为了罗非鱼的养殖和食用安全,在养殖水环境中溴氰菊酯的浓度应严格控制于1.0μg/L以下。
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