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随着食管癌发病率的增加,临床化疗过程中产生的多药耐药(multidrug resistance,MDR)现象是影响食管癌临床疗效的主要因素之一。目前,MDR的机制尚未完全阐明。姜黄素(Curcumin,Cur)是从姜黄中提取的一种天然膳食多酚,具有多种药理作用,例如抗氧化、抗癌、抗炎和抗微生物活性等作用。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)信号转导通路调节细胞生存和细胞死亡之间的平衡,对各种癌症的发展存在直接影响。p38MAPK特异抑制剂SB203580可以有效降低肿瘤细胞内的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达,是有效的多药耐药逆转剂。然而,Cur能否通过p38MAPK信号通路提高食管癌对化疗药物的敏感性并逆转食管癌MDR机制仍有待探索。本实验以食管癌耐药Eca-109/VCR细胞为研究对象,通过姜黄素与长春新碱(Vincristine,VCR)联合作用,研究姜黄素逆转耐药作用的可能机制。应用MTT法检测不同浓度的奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)、紫杉醇(Taxol,TAX)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对食管癌Eca-109和食管癌Eca-109/VCR耐药细胞增殖的影响。MTT检测不同浓度的VCR对食管癌Eca-109/VCR耐药细胞增殖的影响,以及Cur(20μmol/L)对Eca-109/VCR细胞多药耐药的逆转作用。Cur组(20μmol/L)、VCR组(2.0μg/mL)、联合组(Cur 20μmol/L、VCR 2.0μg/mL)以及SB203580组(p38MAPK信号通路抑制剂SB203580:10、20、40μmol/mL)作用于Eca-109/VCR细胞24h后:(1)FCM法检测细胞凋亡率;(2)RT-PCR法分析切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing,ERCC1)、p38MAPK mRNA及多药耐药基因1(multidrug resistance-1,MDR1)mRNA的表达;(3)Western blot法检测p38MAPK信号转导通路的关键分子标志p38MAPK蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38MAPK)蛋白、及其下游耐药相关靶分子人切除修复交叉互补蛋白(excision repair cross-complementation group 1,ERCC1)、P-gp的表达情况。结果显示:Cur作用于Eca-109/VCR细胞抑制率呈剂量依赖性,Cur 20μmol/L时细胞的增殖抑制率为(8.33±0.12)%。VCR联合Cur作用细胞增殖抑制率显著升高,逆转耐药倍数为3.57。Cur 20μmol/L,与VCR 2.0μg/mL联合作用于Eca-109/VCR细胞24h后:(1)细胞凋亡率为(39.53±6.02)%,较单用VCR组明显提高(P<0.05);(2)p38MAPK mRNA、ERCC1 mRNA及MDR 1 mRNA表达率均较单用VCR组降低(P<0.05);(3)p38MAPK、p-p38MAPK、ERCC1、P-gp蛋白表达率均较单用VCR组明显下降(P<0.05)。p38MAPK信号通路抑制剂SB203580(10、20、40μmol/mL)作用24h后,Eca-109/VCR细胞中p-p38、ERCC1、P-gp蛋白表达及ERCC1、MDR1 mRNA水平均明显降低(P<0.05)。上述结果提示,Cur逆转食管癌细胞多药耐药的作用可能与下调p38MAPK通路相关的p38MAPK、ERCC1、MDR1基因mRNA表达及通路相关的p38MAPK、p-p38MAPK、ERCC1、P-gp蛋白表达有关。