向日葵菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary.)侵染所引起的一种向日葵毁灭性病害。目前,抗病品种选育、农业防治、化学防治等对该病害均无有效防治效果。因此本课题组从生物防治着手,对向日葵菌核病的防治进行了系列的研究。以课题组已分离得到的,对核盘菌(S. sclerotiorum)有显著抑菌效果的枯草芽孢杆菌S-16为材料,对其抗菌活性物质的理化性质、气体抑菌物质的组分、不同的培养条件对核盘菌生长影响等进行研究；并利用质粒pHV1249(包含mini-Tn10)进行电击转化,构建突变子库；同时对突变子的生物膜的形成能力进行了研究。目的是找到抑菌物质产生的相关基因,为枯草芽孢杆菌工程菌的改造提供一定的理论依据。具体研究结果如下：1.构建了3000个突变子库,并从中筛选到了3株丧失抑菌能力的突变子；同时也筛选到1株丧失产生气体抑菌物质的突变子；从随机挑选的200株突变菌株中找到6株丧失形成生物能力的菌株。2.抗菌活性物质理化性质的研究。40mL (100mL三角瓶)的装液量,分别以葡萄糖和牛肉浸膏为碳、氮源时最有利于抑菌物质的产生,同时S-16的抑菌粗提物的抑菌活性最高；抑菌物质的热稳定性较高,对蛋白酶较为稳定,较耐酸不耐碱,紫外照射处理对于抑菌活性的影响不明显。根据以上结论,初步推断枯草芽抱杆菌S-16的抑菌物质的主要成分为脂肽类物质。3.探究气体抑菌物质的组分。(1)1-Butanamine, N-methyl-(N-甲基正丁胺)、2-Hexynoic acid (乙炔酸)、3-Butenamide(正丁胺)、Cyclobutanol(环丁醇)、2-Octanamine(正辛胺)和Benzothiazole,2-methyl-(2-甲基苯并噻唑)能够完全抑制核盘菌菌丝的生长。(2)Formamide, N-ethyl-N-phenyl-(N,N-二甲基甲酰胺)、Piperazine,2-methyl-(2-甲基丙酰胺)影响菌丝正常生长,造成菌丝黄化,但是并不影响菌核形成。(3)Ethyne, fluoro-(十二烷基甲铵)和3,3-Dimethyl-4-methylamino-butan-2-one(3,3-二甲基-4-甲氨基丁酮),对核盘菌菌丝和菌核影响较小,只是造成菌丝稀疏,但是不会影响菌核的形成。实验结果表明,抑菌气体中含有多个可以抑制核盘菌菌丝和菌核形成的成分。4.不同培养条件对核盘菌生长的影响。核盘菌生长最适的培养基是PSA,最适的碳源、氮源分别为蔗糖和硝酸铵,在以碳酸铵为氮源培养的核盘菌,菌丝生长情况较差,其培养条件下的核盘菌并不产生菌核原基和菌核。核盘菌的生长情况随着培养基体积和含糖量的增多。偏酸性条件下较有利于核盘菌菌丝的生长及菌核的产生,其中,pH6为最适宜核盘菌生长的pH。