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目的:利用高强度聚焦超声(HighIntensityFocusedUltrasound,HIFU)定位辐照新鲜离体兔眼角膜基质,在HIFU不同的辐照功率下,分别制作不同直径的圆环状焦域,观察HIFU对新鲜离体兔眼角膜组织形态、角膜曲率半径和曲率的影响,探讨HIFU应用于兔眼角膜矫正老视的安全性与有效性,建立HIFU辐照新鲜离体兔眼角膜基质的适宜参数,为HIFU矫正老视提供基础实验数据。方法:HIFU辐照离体兔眼角膜动物模型的构建;实验选用新鲜离体兔眼,分为对照组和实验组,对照组兔眼未行任何实验处理做正常空白对照,实验组:HIFU在相同的治疗时间(6s)下,以1w、2w、3w、4w不同功率定位辐照兔眼角膜基质,分别制作不同直径(8mm,9mm,10mm)的圆环状焦域,大体观察角膜焦域情况,HE染色光镜下观察角膜基质焦域情况,Digimizer软件测量焦域的最大长径和最大宽径,电镜下观察对照组、1w/9mm组和3w/9mm组角膜焦域内基质细胞及纤维改变情况,自动验光仪及角膜地形图检测辐照前后1w/9mm组和3w/9mm组兔眼角膜的曲率半径和曲率。结果:1.成功构建HIFU辐照离体兔眼角膜的动物模型。2.HIFU定位辐照角膜基质,不同辐照功率在角膜上可分别制作不同直径(8mm,9mm,10mm)的圆环状焦域,大体观察可见辐照处角膜呈灰白色、边界清楚,辐照处角膜上皮无损伤。3.经HIFU辐照后,光镜下可见角膜基质内焦域呈椭圆形、颜色加深、边界清楚,基质内HIFU辐照处板层纤维排列规则、纤维之间出现融合,辐照处边界纤维呈现收缩状态,2w/8mm组、3w/8mm组、3w/9mm、3w/10mm组、4w/8mm组、4w/9mm和4w/10mm组角膜焦域内融合纤维之间的间隔减小、焦域边界纤维收缩明显,焦域内基质细胞体积与未辐照区基质细胞体积相比明显减小。焦域环直径相同时、焦域的最大长径与宽径随辐照功率的增大而增大,各实验组比较差异有统计学意义(P<0.05);辐照功率相同时、焦域的最大长径随焦域环直径的增大而减小,各实验组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4.电镜结果表明1w/9mm组角膜基质焦域内细胞超微结构正常、纤维轻度弯曲,而3w/9mm组焦域内细胞出现线粒体和细胞质的溶解、纤维之间扭曲交错明显。5.自动验光仪检测结果显示:HIFU辐照角膜基质后兔眼角膜曲率半径减小、曲率增加,辐照前后差异有统计学意义(P<0.05);在焦域环直径相同的情况下,随HIFU辐照功率的增大,兔眼角膜曲率半径减小及曲率增加更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。角膜地形图检测结果表明:无论HIFU辐照功率高低,HIFU辐照后均可引起角膜曲率的增加。结论:1.HIFU可精确定位于角膜基质层内,辐照处与未辐照处有着明确分界线,HIFU对辐照区外邻近正常组织无明显影响,表明HIFU在兔眼角膜上进行无创矫正老视的探索模式具有损伤少、定位精确的特点,提示HIFU应用于兔眼角膜无创矫正老视具有巨大应用前景。2.本实验认为1w/8mm组、1w/9mm组、1w/10mm组、2w/9mm组和2w/10mm组形成的角膜基质内焦域大小适宜,焦域内仅纤维出现收缩改变、未见细胞损害,适合辐照离体兔眼角膜基质用于老视矫正模型,从组织形态学观察结果来看,其具有较高的安全性,为HIFU矫正老视的后续研究提供了实验基础与依据。3.HIFU热效应能使兔眼角膜基质胶原纤维收缩,产生角膜前凸效应,兔眼角膜曲率半径减小、曲率增加,且随辐照功率的增大角膜曲率增加更明显,HIFU有望成为一种有效矫正老视的新方法。