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背景和目的脑胶质瘤是人类致死性的肿瘤之一,在过去的5年中尽管治疗手段得到改进,脑胶质瘤的中位生存时间也仅仅不过在诊断后14个月[1],预后非常差。在美国和欧洲每年大约77000人被诊断为IV级胶质瘤,且5年生存率低于3%,对于复发的胶质瘤病人,生存时间仅仅数月。肿瘤复发的一个重要机制是脑胶质瘤干细胞的存在,脑胶质瘤干细胞具有自我更新,增殖和分化的潜能,虽然数量少,却在肿瘤的发生、发展、复发和转移中起着重要作用。在过去的十年里,越来越多的证据支持这样的看法,即肿瘤干细胞或起始细胞,负责开发包括入侵和血管生成,导致肿瘤治疗抵抗,和复发。在疾病治疗过程中大部分脑胶质瘤细胞死亡,却提高了或获得了干细胞的特性.因此脑胶质瘤干细胞也成为一个重要的治疗靶点。近年来肿瘤免疫疗法成为肿瘤治疗的研究热点。Junwei等[2]认为脑胶质瘤起始样细胞（可认为脑胶质瘤干细胞）诱导免疫抑制。已有文献报道脑胶质瘤患者的生存时间与其自身免疫状态密切相关。近年来肿瘤免疫学的迅猛发展受到越来越多人们的重视,正常机体免疫系统通过细胞免疫机制能识别杀伤并清除肿瘤细胞,当机体免疫功能低下时,免疫监视功能下降,肿瘤细胞逃避宿主免疫系统攻击开始生长。肿瘤微环境同肿瘤的发生和进展是密不可分的[2],肿瘤细胞的生长离不开肿瘤微环境,肿瘤干细胞的生存也不例外,肿瘤微环境包括肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-Associated Microglia/MacrophagesTAMS,）,髓源抑制性细胞（MDSCs）,调节性CD4+CD25+FOXP3+T细胞（regulatory T cell,Treg）,及一些相关细胞因子,趋化因子和细胞基质。1995由Sakaguchi等发现了机体重要的负性免疫调节成分——调节性CD4+CD25+T细胞（regulatory T cell,Treg）,作为一类具有独特免疫调节功能的细胞,其在肿瘤微环境中发挥着重要的免疫抑制功能,其中FOXP3作为这群细胞的特异性表型指标,它的表达被发现必要且充分的抑制活性。据文献报道,可分为CD4+FOXP3+,CD8+FOXP3+,NKTFOXP3+及双阴性.。同时依据CD45RA（T细胞分化的一个指标）表达量的高低,又可将Treg分为CD45RA+FOXP3+,CD45RA-FOXP3+（high）,CD45RA-FOXP3+（low）,即R-Treg,Non-Treg,A-Treg,在这三群细胞中,主要发挥作用的是A-Treg。调节性T细胞通过TIM3,CD73,PD-1等表面抑制性分子,及分泌胞内因子TGFβ1,IL-10等发挥其负向调节功能。在脑胶质瘤微环境中已有文献报道肿瘤相关巨噬细胞通过分泌细胞因子TGFβ1促进脑胶质瘤干细胞的表达[3]。在本实验中,我们依旧从肿瘤微环境出发,试着探讨调节性T细胞（Treg）细胞对脑胶质瘤干细胞影响,为以后临床治疗过程中杀死干细胞,降低复发率,提高脑胶质瘤患者的生存周期提供一个新的治疗靶点。方法收集脑胶质瘤病人术后2-4小时新鲜组织及患者术中外周血6ml,健康人外周血200ml,采用机械分离法处理并冻存组织,密度梯度离心法分离外周血获得单个核细胞,RT-PCR检测脑胶质瘤组织中CD133 TGFβ1 foxp3等基因的表达水平并分析其相关性;流式细胞术分析外周血中CD4+FOXP3+Treg,R-Treg,Non-Treg,A-Treg表达水平及这三群细胞分泌细胞内因子TGFβ1的情况;采用ELISA-酶联免疫吸附实验检测共孵育后上清细胞因子TGFβ1分泌水平,Transwell实验检测趋化因子CCL2对Treg的趋化功能。结果1.调节性T细胞在脑胶质瘤组织中较外周血高表达,脑胶质瘤组织中干性基因CD133与FOXP3的表达水平具有相关性。2.CD133是脑胶质瘤干细胞的标志。3.CD4+FOXP3+调节性T细胞促进脑胶质瘤干细胞CD133的表达。4.调节性T细胞中A-Treg分泌较高水平TGFβ1促进脑胶质瘤CD133的表达。5.脑胶质瘤干细胞CD133分泌趋化因子CCL2招募Treg到达肿瘤部位,Treg细胞表达CCL2受体CCR4。结论1.调节性T细胞中处于激活状态的A-Treg分泌较高水平的TGFβ1,促进脑胶质瘤干细胞的表达,脑胶质瘤干细胞分泌CCL2招募Treg到达肿瘤部位,Treg细胞表面表达CCL2受体CCR4。2.TGFβ1阻断剂,CCL2阻断剂,CCR4阻断剂都有可能成为临床杀死脑胶质瘤干细胞,降低脑胶质瘤复发率,提高临床患者生存期的治疗新靶点。