目的:观察PI3K/AKT_~AP-1信号通路的表达,研究西黄丸(XHP)对荷瘤小鼠肿瘤微环境中Treg细胞数量变化的机制,阐明西黄丸抗肿瘤作用途径。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型,连续ig给药14 d,剥离肿瘤组织、称重、匀浆,制备单细胞悬液;流式细胞仪(FCM)与免疫组化(IHC)检测肿瘤微环境中Treg细胞数量;TUNEL染色检测肿瘤微环境中Treg细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT、AP-1 mRNA表达;免疫荧光(IF)与蛋白质免疫印迹(Western Blot)检测肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT、AP-1蛋白表达。结果:与阴性对照组比较,西黄丸治疗组瘤重明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);IHC与FCM结果显示肿瘤微环境中Treg细胞数量随西黄丸剂量增加而降低;TUNEL染色结果显示肿瘤微环境中Treg细胞凋亡数量随西黄丸剂量的增加而增加;RT-qPCR结果显示肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT mRNA表达量随西黄丸剂量的升高而降低,AP-1 mRNA表达量随西黄丸剂量的升高而升高;IF与Western Blot结果均显示肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT蛋白表达随西黄丸剂量的升高而降低,AP-1蛋白表达随西黄丸剂量的升高而升高。结论:西黄丸通过下调肿瘤微环境中Treg细胞PI3K、AKT mRNA及蛋白的表达,上调AP-1 mRNA及蛋白的表达,抑制了肿瘤微环境中Treg细胞增殖,促进其凋亡,改善肿瘤微环境免疫抑制状态,逆转免疫逃逸,从而抑制肿瘤生长。