Bid蛋白表达在甘油致大鼠急性肾衰竭时促肾组织细胞凋亡机制及山莨菪碱干预作用的研究

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目的:过度训练引起横纹肌溶解,可导致急性肾功能衰竭,其病死率高达25%。如何防治过度训练所致急性肾衰竭已成为运动医学、军事医学和临床医学的重要课题。本实验通过给大鼠肌肉注射甘油模拟过度训练致肌肉损伤所致的急性肾衰竭。利用此模型研究ARF时肾组织细胞凋亡及Bid蛋白表达的促凋亡机制,观察山莨菪碱对甘油致ARF的保护作用。方法:1实验分组:健康SD大鼠45只,体重180-250g,分为三组:对照组、急性肾衰组和山莨菪碱组。根据观察各时间组又分为三个亚组即甘油注射后1小时组、甘油注射后6小时组和24小时组。2建立急性肾衰竭模型:各组大鼠禁水24小时,急性肾衰组大鼠给于50%甘油生理盐水10ml/kg,双后肢肌肉注射;山莨菪碱组大鼠在给于50%甘油生理盐水前15分钟腹腔注射盐酸山莨菪碱10mg/kg;对照组大鼠双后肢注射生理盐水10ml/kg。3取材:各组实验大鼠使用乙醚麻醉,腹部正中切开,于下腔静脉采血,分别注入干管和抗凝管待测,并摘取双肾,一个置入4℃4%多聚甲醛中固定,一个置于-80℃冻存。4观察指标及方法:使用全自动生化仪检测血生化指标;制作病理切片,观察病理改变;应用TUNEL技术检测肾组织细胞凋亡;应用免疫组织化学方法检测肾组织细胞中Bid和caspase-8蛋白的表达;应用Western Blotting方法检测肾组织中Bid蛋白的活化情况。
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