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大量临床研究表明，急性髓性白血病(acute myeloid leukemia，AML)患者的白血病细胞在骨髓异常增殖，并不断释放到外周血中，部分病人可形成白血病细胞淤滞和血管外浸涧，导致严重威胁生命的并发症。因此如何防治这些并发症已成为治疗时关注的主要问题之一。目前有关白血病细胞是如何从骨髓释放入外周血并穿过血管壁造成血管外浸润的机制还不十分清楚，更没有很好的防治措施。因此围绕这一机制，有些学者进行了研究。认为AML细胞只有先黏附并穿过血管壁，才能进入外周血并在髓外增殖。黏附分子和黏附受体在这一过程中起一定作用。 目前有关血循环中成熟白细胞穿过血管内皮细胞的机制研究认为，在正常情况下，白细胞膜和血管内皮细胞膜处于相对抗黏附的状态，只有很少量的白细胞穿过血管壁。当炎症时局部巨噬细胞释放大量的炎性细胞因子，如肿瘤坏死因子，白细胞介素-1等，这些炎性细胞因子一方面直接激活血管内皮细胞使之产生黏附分子增多，同时介导白细胞表达黏附分子增加，此时白细胞与血管内皮细胞的黏附增加而易释放到血管外。细胞黏附分子(CAMs)及其配体在这一过程中起了关键作用。 中文摘要 关于勃附分子在AML白细胞淤滞和血管外浸润中的作用，初步研究表明，白血病细胞的勃附分子的表达发生异常，这些异常的戮附分子在白血病细胞从骨髓中释放入外周血，并造成组织器官的浸润，以及白血病细胞之间的相互勃附中起了重要作用。还观察到白血病细胞与内皮细胞共同培养后二者的勃附性明显增加，是由于白血病细胞与内皮细胞表达的勃附分子增加所介导的，这种白血病细胞与内皮细胞薪附的增加在白细胞淤滞的内皮细胞损伤中起重要作用。如果能证实哪些勃附分子在AML内皮细胞损伤中起主要作用，使用其抑制剂将有助于改善白细胞淤滞和血管外浸润这一病理生理过程。 本课题对AML细胞与内皮细胞的戮附进行了研究，并观察ICAM一1及其配体LFA一1在此勃附中的作用，旨在通过研究ICAM一1和LFA一1在AML细胞与内皮细胞勃附中的作用，来分析ICAM一1和LFA一1对急性髓性白血病患者白细胞淤滞和血管外浸润的可能影响。AML细胞与内皮细胞的薪附。 为了观察AML细胞与内皮细胞的豁附是否增强。本实验研究了AML细胞与内皮细胞的勃附情况，每次实验以正常骨髓单个核细胞作为对照。在AML细胞或正常骨髓单个核细胞分别与静止的和TNF-a激活的内皮细胞共同孵育10分钟后，观察与内皮细胞的豁附率。结果显示:正常骨髓单个核细胞或AML细胞与静止(未激活)的内皮细胞共同孵育10分钟，只有很少量的正常骨髓单个核细胞或AML细胞与未激活的内皮细胞勃附，分别为(22.84土3.55)%，n二8，和(24.33士2.87)o，o，n=ZI。当内皮细胞先作用于100口ml TNF一a6小时 〔即被TNF一a激活)后，再进行勃附实验，正常骨髓单个核细胞或山西医科人学博士研究生学位论文AML细胞与TNF一。激活的内皮细胞的砧附明显增强，分别为(79.58士6.71)%，p<0.001，和(81.87士4，09)%，p<0.001。结果表明TNF-a能够激活内皮细胞，促使其与正常骨髓单个核细胞或AML细胞的勃附。 AML细胞与未激活的内皮细胞共同孵育10分钟后，仅有很少量的细胞勃附(24.33士2.87)%，而共同培养24小时后，豁附到未激活内皮细胞上的AML细胞数明显增多(82.06士7.05)%，p<0.001。正常骨，髓单个核细胞与未激活的内皮细胞共同培养24小时后的豁附为(2 6.60士3.40)%，与二者共同孵育10分钟(22.84士3，55)%相比，无明显差别。以上结果表明，延长AML细胞与未激活内皮细胞的作用时介lJ可以促进二者的豁附。也表明在延长孵育时间的过程中，未激活内皮细胞的豁附特性发生了改变。 为了确认这种改变是由于AML细胞直接作用的结果还是其产生的某些物质对内皮细胞产生的刺激作用，我们又观察了AML细胞培养24小时后的上清对中性粒细胞与未激活的内皮细胞勃附的影响。用正常骨髓单个核细胞培养上清作为对照，结果显示:正常骨髓单个核细胞培养上清作用后的内皮细胞与中性粒细胞的勃附为(2 5.77土6.16)%，而AML细胞培养上清作用后的内皮细胞与中性粒细胞的赫附明显增强为(83.9处3.86)%，n=21，p<0.001。说明AML细胞培养上清能够促进内皮细胞与中性粒细胞的豁附。因此延长AML细胞与未激活内皮细胞的作用时间后勃附的增加是由于AML细胞培养上清中某些物质作用的结果。枷L细胞培养上清介导的内皮细胞ICAM一1的表达中文摘要 一般认为，内皮细胞勃附能力的增强是由于内皮细胞被激活后产生的勃附分子(ICAM一1，VCAM一1和E一选择素)增加的结果。为了评价AML细胞培养上清对内皮细胞勃附分子ICAM一1表达的影响，收集AML细胞培养上清作用24小时后的内皮细胞，正常骨髓单个核细胞培养上清作用24小时后的内皮细胞作为对照，用RT一PCR及Westemblot分析显示，与对照组相比，AML细胞培养上清作用后内皮细胞ICAM一 1 mRNA及蛋白质的表达明显增加。用荧光标记ICAM一1(CD54)抗体进行染色，通过流式细胞仪分析这些内皮细胞膜表面ICAM一1表达情况，结