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酵母的多样性在酿造具有本区域“风土”特色葡萄酒中起着举足轻重的作用。商品化活性干酵母的广泛使用,除带来葡萄酒感官品质的同质化,更重要的是,易对本土野生酵母产生排挤。为了避免本土酵母多样性的降低,亟待调查本土酵母的多样性。本研究利用WLN培养基(Wallersteins Laboratory Nurtrient agar)、26SrDNA D1/D2区序列和Interdelta指纹图谱分析等方法,对我国山东蓬莱2012-2013年9个葡萄品种自然发酵中采集到的3383株酵母菌株进行归类鉴定,为筛选本土优良酵母菌株,酿造本土“风土”葡萄酒奠定基础。主要的研究结果如下:1.赤霞珠、霞多丽自然发酵中所获得的37类不同WLN形态的酵母菌分属于12属17种。分别为Saccharomyces cerevisiae(酿酒酵母)、Hanseniaspora uvarum(葡萄汁有孢汉逊酵母)、Sporidiobolus pararoses(准红锁掷孢酵母)、Meyerozyma guilliermondii、Issatchenkia terricola(陆生伊萨酵母)、Cryptococcus magnus(大隐球酵母)、Aureobasidium pullulans(普鲁兰酵母)、Pichia aff fermentans(发酵毕赤酵母)、Saccharomycopsis fibuligera(扣囊复膜酵母)、Pichia occidentalis(罕见毕赤酵母)、Wickerhamiella domercqia(拟威克酵母)、Hanseniaspora opuntiae(仙人掌有孢汉逊酵母)、Pichia kluyveri(克鲁维毕赤酵母)、Saccharomycodes ludwigii(路德类酵母)、Candida zemplinina(假丝酵母)、Wickerhamiella sp.Cryptococcus sp.,占分离菌株的比例分别为40.5%、31.4%、2.3%、1.9%、8.8%、0.4%、3.4%、1.8%、0.2%、1.5%、0.2%、0.5%、1.8%、0.3%、3.7%、0.2%、0.3%。2.2012年山东蓬莱8个品种的葡萄自然发酵时分离获得538个酿酒酵母单菌落,用Interdelta指纹图谱分析获得82种基因型。在霞多丽(Chardonnay)、赤霞珠(Cabernet Sauvignon)、贵人香(Riesling)、梅鹿辄(Merlot)、品丽珠(CabernetFranc)、小芒森(PetitManseng)、马瑟兰(Marselen)、泰纳特(Tannat)自然发酵中分别有18、3、6、16、11、16、9和6种基因型,分别占总基因型的11.0%、3.6%、7.3%、19.5%、13.4%、19.5%、11.0%、7.3%,其各品种优势基因型分别为ER-17、CA-19、GA-22、LC-30、PB-43、IB-54、MH-74、TA-77。同一产区同一年份,不同品种葡萄间自然发酵时所含酿酒酵母基因型的种类和数目不尽相同。3.2013年山东蓬莱9个品种的葡萄自然发酵时分离获得的407个酿酒酵母单菌落,经区分获得90种基因型。在霞多丽(Chardonnay)、赤霞珠(Cabernet Sauvignon)、贵人香(Riesling)、梅鹿辄(Merlot)、品丽珠(CabernetFranc)、小芒森(Petit Manseng)、马瑟兰(Marselen)、泰纳特(Tannat)、小味儿多(PetitVerdot)中分别有19、16、4、14、12、13、4、10和 11 种基因型,占总基因型的21.1%、17.8%、4.4%、15.6%、13.3%、14.4%、4.4%、11.1%、12.2%,其优势基因型分别为Em-65、C1-12、Ga-17、Lc-26、Pd-41、Id-75、Ma-20、Tb-50、Pk-47。4.聚类分析结果可知,源自相同葡萄品种的酿酒酵母菌株间遗传差异性较小,而来自不同葡萄品种的酿酒酵母菌株间遗传差异性较大,来自两个年份的酿酒酵母菌株间遗传差异性较大。