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背景:髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)是儿童脑内最常见的恶性肿瘤。MB发生率占所有儿童脑肿瘤的近10%。MB具有高侵袭、易扩散、难根治等特点。目前髓母细胞瘤的治疗包括手术的完全切除及术后全脑和脊髓的放疗、化疗。随着治疗手段的日益进步,5年生存率提高到50-80%,但术后放疗、化疗造成儿童认知功能障碍,出现严重的不良预后。现急需进一步探索MB的发病机制,并开发新的、有效且副作用较小的治疗方法。随着miRNA在疾病中的作用及机制的发现,miRNA在MB中的功能和作用被逐渐揭秘。已证明miRNA-128-3p在多种疾病及肿瘤中表达下调,并与疾病的发生、发展及预后相关。但miRNA-128-3p对MB发生、发展中的影响及其机制仍需进一步研究。目的:1.通过生物信息学查找MB组织中差异表达miRNA,分析miRNA-128-3p在MB组织中的表达。2.选择DAOY细胞为研究对象研究miRNA-128-3p对MB细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。3.预测并验证miRNA-128-3p的靶基因,研究miRNA-128-3p抑制MB生长的分子机制。方法:1.利用生物信息学网站筛选出miRNA-128-3p在MB中异常表达,进一步通过实时荧光定量PCR法验证miRNA-128-3p在MB中的表达情况。2.以DAOY细胞系为研究对象,通过转染miRNA-128-3p mimic使MB细胞中的miRNA-128-3p过表达,利用细胞划痕实验、CCK-8增殖实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测miRNA-128-3p对DAOY细胞的迁移、侵袭、增殖、和凋亡的影响。3.使用生物信息学预测并筛选miRNA-128-3p的靶基因为Msi1。通过使用Western blot及qRT-PCR检测Msi1在MB组织及DAOY细胞中的表达水平。结果:1.选用GEO数据库筛选出在MB组织中表达异常的miRNA为miRNA-128-3p,通过qRT-PCR法检测显示miRNA-128-3p在MB及正常脑组织中均表达,miRNA-128-3p在MB中表达下调。2.细胞划痕实验及Transwell实验结果显示过表达miRNA-128-3p能够抑制MB侵袭和迁移。3.CCK-8增殖实验结果显示过表达miRNA-128-3p能够抑制MB的增殖。4.流式细胞术检测结果提示过表达miRNA-128-3p能够诱导MB细胞凋亡。5.通过生物信息学网站预测Msi1可能是miRNA-128-3p的下游靶基因,Western blot及qRT-PCR检测Msi1在MB组织、正常脑组织及DAOY细胞中的表达量,结果提示Msi1在MB组织中高表达,且miRNA-128-3p可靶向调控Msi1进一步影响MB的发生、发展。结论:miRNA-128-3p在MB组织中表达下降,通过靶向调控Msi1的表达进一步抑制MB细胞的侵袭、迁移、增殖,并诱导凋亡。