蛋白质糖基化是翻译后最重要、最普遍的修饰之一,在调节细胞-细胞相互作用、分子识别、蛋白质折叠等多种复杂的生物学过程中发挥着重要作用,任何人类疾病都与异常的N-糖基化有关。目前,质谱相关技术已成为表征蛋白质糖基化的首要技术。然而,糖肽固有的低丰度、糖基化位点的异质性以及非糖基化肽共存引起的严重离子抑制,使得糖肽的直接质谱分析仍然是一个挑战。所以,在质谱分析检测之前需要一个有效富集过程。在生物分子、靶向药物、治疗癌症等生物技术领域,磁性纳米材料有着广阔的应用前景。本论文利用水热法制备分散性好,生物相容性好,无毒,外磁响应强的功能化磁性纳米粒子,并应用于胰蛋白酶消化产物中糖肽的富集。研究内容如下:1、通过水热法制备功能化磁性纳米材料Fe3O4@NH2;制备功能化磁性材料Fe3O4@NH2-GlcNAc设计两种制备方法,方法一:DCC作为缩合剂,活化Boc-Asn-GlcNAc羧基后,与Fe3O4@NH2氨基结合形成酰胺键得到带有寡糖的蛋白质包覆的磁性复合粒子;方法二:聚乙烯亚胺与Boc-Asn-GlcNAc结合得到高分子化合物,通过水热法与FeCl3·6H2O为铁源制备。通过方法对比,选择方法一进行后续富集研究;通过水热法制备功能化磁性材料Fe3O4@GlcNAc。2、通过透射电镜(TEM)、傅里叶变换红外(FT-IR)、X射线衍射(XRD)等技术手段对所制备的三种功能化磁性材料进行表征。结果表明:Fe3O4@NH2具有氨基亲水性基团,形貌为球形,粒径大约282 nm;Fe3O4@NH2-GlcNAc具有寡糖亲水性基团,枝接率较低。Fe3O4@GlcNAc具有单糖亲水性基团,粒径大约 190 nm。3、结合亲水作用和磁性分离技术的两者优点,以唾液酸糖肽(SGP)为糖肽模型,对所制备的功能化磁性材料进行糖肽富集应用研究。通过结果表明,Fe3O4@NH2-GlcNAc 比 Fe3O4@NH2富集能力强。以糖肽与肽的混合液为研究对象,Fe3O4@NH2-GlcNAc对带有亲水基团肽有少许富集,针对于亲水性大分子有选择性。以胎球蛋白为研究糖蛋白模型,结果表明Fe3O4@NH2-GlcNAc富集方法比丙酮富集方法有较高得选择性。