槲皮素及其代谢物对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抗肿瘤作用

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本文研究槲皮素(Quercetin,简写为Q),3’-硫酸酯化槲皮素(Quercetin-3’-sulfate sodium salt,简写为Q3S),3’-糖醛酸槲皮素(Quercetin-3’-glucuronide sodium salt,简写为Q3G),异鼠李素(Isorhamnetin,简写为IS),3’-甲氧基-3-糖醛酸槲皮素(Isorhamnetin-3’-glucuronide sodium salt,简写为I3G)的体外抗肿瘤活性。研究发现,槲皮素及其代谢物对肿瘤细胞的抑制作用具有剂量依赖效应,即随着药物浓度的增加其对肿瘤细胞的抑制作用也相应的增强。我们选用处于对数生长期的人乳腺癌MCF-7细胞为实验对象,采用MTT法测定MCF-7肿瘤细胞的存活率。当浓度100gM的Q,IS和Q3S三种药物作用于MCF-7肿瘤细胞48h后,细胞的存活率分别为33.1%,34.2%和36.2%。采用LDH法测定这几种黄酮类化合物对MCF-7肿瘤细胞的毒性,当Q,IS和Q3S的浓度为100μM作用于细胞48h后,肿瘤细胞释放的LDH的含量分别为1389.7U/L,1359.4U/L和1327.1U/L。Hoechst33258染色法观察肿瘤细胞的形态变化,用100μM的Q,IS和Q3S作用于肿瘤细胞48h后,细胞形态发生了明显的变化,比如出现细胞核皱缩,形成絮状的凋亡小体和细胞碎片等。采用Annexin V-FITC和PI染色法检测药物对细胞凋亡的影响,当Q,IS和Q3S浓度为100μM作用MCF-7肿瘤细胞48h后,分别有70.8%,68.9%和58.18%的肿瘤细胞进入早期凋亡状态。利用流式细胞仪检测这几种黄酮类化合物对人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞细胞周期的影响,当100μM的药物作用于细胞48h后,Q,IS和Q3S分别可以将50.35%,47.43%和42.04%的细胞抑制在S期,这说明药物可以将肿瘤细胞抑制在S期。利用流式细胞仪检测细胞内ROS含量的变化情况,当100μM的Q,IS和Q3S作用于MCF-7肿瘤细胞12h后,细胞内H202的含量分别为68.14%,55.83%和51.13%,细胞内02-含量分别为84.1%,77.6%和70.27%。本实验研究发现,Q,IS和Q3S均对人乳腺癌MCF-7肿瘤细胞具有很好的抑制作用,而I3G和Q3G的抗肿瘤活性就略低于这三种药物。此实验为以后研究和开发新的黄酮类化合物都具有极其重要的作用。
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