目的:1型糖尿病是一种以胰岛素缺乏及高血糖为其主要特征的自身免疫病.目前的治疗除注射外源性胰岛素外,尚无其它切实有效的方法.因此,采用转基因表达胰岛素的方法是目前研究的方向之一.该项工作目的在于利用壳聚糖转染法研究人胰岛素基因在体外培养的小鼠成纤维细胞的基因转染和表达.方法:该研究采用壳聚糖转染法将重组的人胰岛素基因表达质粒转染小鼠成纤维细胞(NIH3T3),转染后72小时,经G418抗性筛选出阳性克隆并培养到第24天,用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达,同时用ELASA法检测胰岛素转染后24天的细胞培养液的胰岛素水平.结果:(1)转染pCMV.Ins的NIH3T3细胞培养液的胰岛素水平明显高于未转染组(P<001)及pCMV转染组(P<0.01).(2)未转染组与pCMV转染组细胞培养液的胰岛素水平无明显变化(P>005).结论:(1)人胰岛素基因在NIH3T3细胞系的转染成功和表达说明基因治疗有望成为1型糖尿病的重要治疗手段.(2)壳聚糖载体具有简便、安全、缓释及多途径给药等优点,是一种很有前途的胰岛素基因治疗之载体.