【摘 要】
:
动静脉血栓形成是人类发病及死亡的主要原因,现有的抗凝血药物由于副作用较大,在治疗凝血功能异常中的应用比较局限,所以新型抗凝药物的开发具有重要的临床意义。线虫抗凝肽(
论文部分内容阅读
动静脉血栓形成是人类发病及死亡的主要原因,现有的抗凝血药物由于副作用较大,在治疗凝血功能异常中的应用比较局限,所以新型抗凝药物的开发具有重要的临床意义。线虫抗凝肽(Nematode anticoagulant peptides,NAPs)是一类从犬钩口线虫体内提取的小分子多肽类物质,这类多肽具有高效抗凝作用,皮摩尔浓度就可以抑制血液凝集,因此重组线虫抗凝肽(Recombinant nematode anticoagulant peptide,rNAP)有望开发成一种新型的高效抗凝药物。 目的 本研究采用大肠杆菌(Escherichia coli, E. coli)融合表达rNAP5,并进行了纯化及活性方面的研究,以期为新型抗凝药物的开发应用打下基础。 方法与结果 1.表达载体的构建及目的蛋白的表达 含有融合E. coli硫氧还原蛋白(Thioredoxin,TRX)的NAP5全基因序列的质粒pET11a/TRX-rNAP前期已经由本实验室构建,为了方便后期的纯化工作,本研究中以pET11a/TRX-rNAP质粒为模板,PCR扩增出HIS-TRX-rNAP全长序列,插入pET11a载体的NdeI和BamHI酶切位点之间,构建出pET11a/HIS-TRX-rNAP表达载体,转化入DH5α菌株,经测序证实成功地在TRX-rNAP序列前方插入8个组氨酸(Histidine,HIS)三联密码子。将测序正确的质粒在E. coli BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE及Western blot检测证实,融合蛋白HIS-TRX-rNAP在
其他文献
新零售商业模式通过数据驱动重构人、货、场的关系,进而创造价值的倍增效应.本文旨在探索新零售业态的商业模式实现价值倍增的动因及其作用机理.首先,围绕商业模式关键构成要
克虏伯输送技术公司推出的DU.14香蕉筛系双层不平衡驱动振动筛。上层筛板倾角大,下层则基本皇水平布置。这种结构可以通过薄层筛分高效地处理大量的给料。给料高速通过上层筛板
近几年,数字货币的发展令全球瞩目.作为数字经济时代的产物,数字货币更新迭代速度极快,不断冲击着社会政策、经济、金融、科技的现有框架,因此深入探究数字货币发展的影响具
陶渊明描绘的世外桃源一直是中国人心目中理想乡村的范本。桃花源远离政治交替和战乱的影响,渔人找到的是聚村而居的一个群体,而非独自隐居世外的高人。有老人有儿童,有足够繁衍
我们的家乡山多地少,人们常常在山上开荒种地,使得水土流失严重。随着人们生态意识的提高及国家“植树造林,退耕还林”政策的出台与实施,村民又在山上及坡地种上各种果树,如
人细小病毒B19(Human parvovirus B19,HPVB19)是已知的细小病毒属中唯一致人类疾病的病毒,是动物病毒中结构最简单的一种单链,线状DNA病毒,DNA长度约5.6Kb。于1975年被偶然发
介绍用钻屑指标法预测煤巷掘进工作面突出危险性方法以及在前岭煤矿预测试验结果,确定了突出危险临界值和突出危险性等级
This paper introduces the method of predicting t
Effect of application of K fertilizer and wheat straw to soil on crop yield and status of soil K in the plough layer under different planting systems was studie
本研究通过基因工程方法构建高表达MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并优化发酵、纯化条件。以MTT法和集落形成实验检测MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在体外的促造血增殖活性;
本研究首次建立了人类正常结肠上皮的双向凝胶电泳参考图谱,鉴定了162种非冗余蛋白质,并对这162种蛋白质按功能和亚细胞定位进行了初步分类;发现了37种结肠上皮蛋白质存在翻