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背景与目的：大肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，愈早发现愈早治疗其五年的存活率就愈高，然而，大约有20—45％的大肠癌患者在外科切除术后仍发生局部复发或远端微转移。这主要是由于在手术前或手术中原发病灶的部分癌细胞渗漏出来。在本实验中，利用CK-19、CK-20和CEA分子标志检测大肠癌患者外周血中循环性癌细胞，旨在建立一种非侵袭性、简单而有效的方法，用于临床上大肠癌筛检、诊断以及术后微转移状况预测。 方法：①为了检测大肠癌患者外周血中循环性癌细胞的出现并评估其与临床病理特征以及术后微转移状况的相关性，检测72例大肠癌患者和30例健康志愿者外周血中CK-19、CK-20和CEA mRNA的表达。Trizol方法抽提外周血总RNA，利用RT-PCR方法分别扩增CK-19、CK-20和CEA mRNA，以GADPH为内参。分析三个分子标记的检出与临床病理学特征以及术后微转移状况的相关性。②利用荧光定量PCR技术，采用比较Ct法的相对定量方法，扩增、定量106例大肠癌患者和100例健康志愿者外周血中CK-19、CK-20和CEA mRNA的表达。利用ROC曲线对实验结果进行分析，确定CK-19、CK-20和CEA临床诊断的诊断试验效果临界值。 结果：①RT-PCR方法检测大肠癌患者外周血循环性癌细胞具有较高的灵敏度，本检测系统中每1ml外周血中只要含有5个以上癌细胞，即可被检测出来；RT-PCR方法检测结果表明，72例大肠癌患行外周血中CK-19、CK-20、CEA mRNA阳性表达率分别为66.7％、52.8％和72.2％。其中CEA的敏感度最高；而在30例健康志愿者中仅有1例CK-19和1例CK-20出现阳性；②CEA mRNA是临床病理学特征最有效的指示者，它的阳性表达与肿瘤的侵润程度(P=