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目的:通过观察家兔皮肤移植经rhIL-10作用后,血清中CC、IL-8/CXCL8趋化因子的变化,探讨CC、IL-8/CXCL8趋化因子在rhIL-10抗免疫排斥机制中的作用,为rhIL-10的开发及应用提供实验依据。
方法:(1)皮肤移植家兔分6组:①rhIL-10低剂量组;②rhIL-10高剂量组;③CsA低剂量组;④CsA高剂量组;⑤rhIL-10+CsA低剂量联合组;⑥生理盐水组。
(2)用药方案:于术前1天开始用药,每只家兔连续10天肌肉注射。
(3)各组分别于术前1天、术后1、4、7、14、21、28天取外周血,分离血清,以酶联免疫吸附法检测移植家兔血清CC、IL-8/CXCL8趋化因子水平。
结果:(1)各组移植术后IL-8/CXCL8水平较术前明显升高,⑥组第7天达到高值,并持续到第14天;其余各组术后14天达最高值,随后逐渐下降,术后28天基本恢复术前水平;术后1天⑥组比其它组均高,其中⑥组与①组、⑥组与②组之间差异有统计学意义(p<0.05);术后4天⑥组比其它组均高,除与⑤组差异无统计学意义之外,其余各组间差异有统计学差异(p<0.05),①组>②组,③组>④组,且差异有统计学意义(p<0.05);术后7天,⑥组比其它组均高,且差异有统计学差异(p<0.05)。
(2)各组移植后MCP-1/CCL2水平较术前明显升高(p<0.05),均于术后14天达到最高值,然后逐渐下降;术后1、4天,各组MCP-1/CCL2水平均低于⑥组,其中①组与⑥组,②组与⑥组,⑨组与⑥组,④组与⑥组差异有统计学意义(p<0.05);②组>④组,差异有统计学意义(p<0.05);术后7天,各组MCP-1/CCL2水平均低于⑨组,其中①组与⑥组,⑤组与⑥组差异有统计学意义(p<0.05);①组、②组、③组、④组、⑤组组内两两比较差异无统计学意义(p>0.05)。
(3)各组移植后MIP-1α/CCL3水平较术前明显升高,均于术后14天达到最高值,然后逐渐下降;术前及术后1天,除术后1天①组与⑥组间差异有统计学意义(p<0.05)之外,其余各组间血清MIP-1α/CCL3水平差异无统计学意义(p>0.05):术后4天,各组MIP-1α/CCL3水平均低于⑥组,且差异有统计学意义(p<0.05);③组>④组、②组>④组、⑤组>④组,差异有统计学意义(p<0.05);术后7天,各组MIP-1α/CCL3水平均低于⑥组,且差异有统计学意义(p<0.05);①组、②组、③组、④组、⑤组组内两两比较,除②组>④组差异有统计学意义(p<0.05)外,其余各组间差异无统计学意义(p>0.05)。
(4)各组移植后MIP-1β/CCL4水平较术前明显升高,均于术后14天达到最高值,随后快速下降,低于术前水平;术后1天,①组<⑥组,差异有统计学意义(p<0.05);②组、③组、④组均低于⑥组,但差异无统计学意义(p>0.05);①组<③组,②组<④组,差异无统计学意义(p>0.05);①组<⑤组,②组<⑤组,且差异有统计学意义(p<0.05)。术后4、7、14天,①组、②组、③组、④组、⑤组、⑥组组内两两比较无统计学差异(p>0.05)。
结论:(1)CC、IL-8/CXCL8趋化因子在皮肤移植后明显升高,反应其分子合成在排斥反应时明显增加,可能在急性排斥反应中发挥了重要作用。(2)CC、IL-8/CXCL8趋化因子在皮肤移植后表现为高表达,且随着排斥反应加重而进一步增高,皮片排斥后下降,表明CC、IL-8/CXCL8趋化因子可以作为观察和诊断移植排斥的合适标志物。(3)rhIL-10抑制组IL-8、MCP-1、MIP-1α在移植后早期含量明显低于生理盐水组,表明作为固有免疫因素IL-8、MCP-1、MIP-1α参与了rhIL-10抑制移植排斥反应的综合作用。