【摘 要】
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第一部分:轮状病毒(Rotavirus,RV)是1973年由澳大利亚学者Bishop发现的,归为呼肠孤病毒科,轮状病毒属,已被确认为是引起全世界婴幼儿急性胃肠炎最常见的病因。在成人中,轮状病毒同
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第一部分:轮状病毒(Rotavirus,RV)是1973年由澳大利亚学者Bishop发现的,归为呼肠孤病毒科,轮状病毒属,已被确认为是引起全世界婴幼儿急性胃肠炎最常见的病因。在成人中,轮状病毒同样也会引起急性腹泻,其中成人腹泻轮状病毒(ADRV)是我国洪涛院士于1983年首先发现的一种人B组轮状病毒,它在我国许多地区曾引起大规模以成人为主的霍乱样腹泻的暴发流行。轮状病毒引起的腹泻至今尚无特效药物进行治疗,发展轮状病毒疫苗成为当今世界卫生组织疫苗发展计划的首要任务之一。本部分主要是在原核细胞中表达了人B组轮状病毒WH-1株nsp2基因,免疫小白鼠制备了抗血清,并做了不同型别的A组轮状病毒重配株的构建,以期为轮状病毒的防治及疫苗的研制提供实验依据。具体研究内容如下:
第一章对轮状病毒的研究状况作了综述报道,主要从RV的基础研究和疫苗的研制两个方面进行了阐述
第二章将nsp2克隆到原核表达载体pGEX-KG中,诱导表达了61kDa的GST-NSP2的融合蛋白,免疫小白鼠,获得了高特异性的鼠抗血清。
第三章轮状病毒重配株的构建,利用杆状病毒表达系统介导A组G3型轮状病毒vp7基因导入HT-29细胞,与另一完整的G2型轮状病毒发生重配,然后通过空斑纯化,RT-PCR的方法进行重配株的筛选。
第二部分:日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)简称乙脑,是一种由乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的人畜共患的病毒性传染病。本部分从猪乙脑病毒细胞培养物中提取RNA,通过分段RT-PCR技术得到其全基因组,为感染性克隆的构建打下了基础;对基因组结构的分析也为乙脑病毒的基因工程疫苗的研究奠定了理论基础。本部分主要包括以下内容:
第一章针对乙型脑炎病毒的研究现状作了综述报道,主要是从乙型脑炎病毒的基础研究和疫苗的研制两个方面进行阐述,特别是对乙型脑炎病毒致病机制及疫苗的研究进展作了详细的报道。
第二章根据genebank上乙型脑炎病毒的JaOArS982株的全序列分段设计引物,从湖北省农科院分离的病毒培养物中提取RNA,通过分段RT-PCR,得到全基因组序列并进行序列分析,发现该株与HW株亲缘关系最近。
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