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本研究主要通过二倍体和四倍体杂交选育三倍体葡萄新品系。二倍体亲本为2004-6-12、大濑户、巴拉多、美人指和亚历山大(分别简称为6、D、B、M、A),四倍体亲本包括高鲁碧、安芸皇后和翠峰(分别简称为G、Q、S),其中2004-6-12、大濑户、巴拉多为雄性不育(雌能花)单株,其他亲本均为完全花品种。共有21个杂交组合。分别于人工杂交后37天、42天、47天、52天和57天采集未成熟果实,进行胚挽救培养。幼胚萌发后,经过扩繁,对幼苗进行了温室炼苗移栽。本研究对影响胚挽救的胚珠发育培养基、胚珠处理方式和不同倍性亲本的杂交亲和性等因素进行了探讨,对二倍体×四倍体葡萄获得的杂种幼苗进行了倍性鉴定。另外采集成熟种子沙藏后田间播种,获得杂种苗,并且在四倍体自交后代中选育得到三倍体植株。取得的主要研究结果如下:1.获得了一批三倍体葡萄单株利用二倍体和四倍体葡萄杂交培育三倍体葡萄新品系。采用胚挽救技术对杂交后的幼胚进行培养,获得了41个杂种单株,另外通过田间播种获得了12个杂种单株。综合利用流式细胞仪检测、染色体观察、形态学比较(气孔观察等)和分子标记等技术,在幼苗期进行倍性检测和遗传鉴定,确定6Q47-1,6Q52-1,6Q52-3,6S52-3,6S52-5, DG42-1, DG42-2, BQ52-5, AS52-1, MS52-2, MS47-1, MS47-2, MS47-3, MS57-2, BG-003, BG-005, MS-002, MS-003等18个单株为三倍体,其他杂种单株均为二倍体。2.以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,成功诱导了体细胞胚发生。初生胚诱导培养基为NN69+NAA1.80mg·L-1+CH0.4mg·L-1+AC2g·L-1+蔗糖30g·L-1,52DAP和47DAP取样培养时,初生胚诱导率分别达到11.11%和16.67%;次生胚诱导培养基分别为3/4MS+IBA0.35mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6g·L-1和MS+6-BA1.5g·L-1+IBA0.2g·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6g·L-1;体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检测源自同一未成熟合子胚(胚珠)的不同株系的遗传稳定性,结果显示,所测植株均为三倍体,且都来自杂交所得的未成熟合子胚。3.从四倍体葡萄翠峰的自交后代中选育得到三倍体新品系5-11。采用形态学比较、流式细胞仪检测、染色体观察和SSR标记等技术对翠峰的实生后代株系进行检测,确定单株5-11为三倍体,且生长、结果状况良好。